厭氧菌臨床檢驗(yàn)的重要性

     厭氧菌檢驗(yàn)是臨床微生物檢驗(yàn)的重要組成部分。在無氧（或少氧）條件下,或氧化還原電勢低的條件下才能繁殖的細(xì)菌稱為厭氧菌。

     厭氧菌在人體腸道、口腔、上呼吸道、泌尿生殖道等處的正常菌群中占有優(yōu)勢,如長期使用廣譜抗生素、激素、免疫抑制劑等，在發(fā)生菌群失調(diào)或機(jī)體免疫力下降或細(xì)菌進(jìn)入非正常寄居部位時(shí)，厭氧菌可能發(fā)生嚴(yán)重的甚至致死的內(nèi)源性厭氧菌感染。厭氧菌感染常發(fā)生在深部傷口,但也可伴兼性厭氧菌和需氧菌侵犯人體任何器官和組織,當(dāng)深部膿腫、敗血癥等常規(guī)細(xì)菌學(xué)檢查陰性時(shí),往往源于厭氧菌感染。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，牙周炎及牙根管炎厭氧菌感染率高達(dá)96.67%～100%[1,2];肛周、腹部和肺部厭氧菌感染率也比較高,厭氧菌和需氧菌混合性感染率達(dá)72%～91.7%[1,3];肺部感染和肺膿腫厭氧菌感染率為40.1%～84.2%[4,5];病原菌以革蘭陰性厭氧桿菌居多,其中類桿菌屬為優(yōu)勢菌;機(jī)體免疫功能低下時(shí),如癌癥、骨髓移植等患者容易引發(fā)菌血癥[6-8];重癥監(jiān)護(hù)病房的患者因長期住院,容易發(fā)生醫(yī)源性感染。在婦產(chǎn)科各種感染性疾病中有100%,直腸周圍膿腫有77%可檢出厭氧菌,而且有相當(dāng)一部分病例是單一的厭氧菌感染[1]?？股叵嚓P(guān)性腹瀉中難辨梭菌的感染常通過接觸方式傳播,發(fā)生醫(yī)院感染暴發(fā)流行,嚴(yán)重者導(dǎo)致死亡[9]。所以，對厭氧菌檢驗(yàn)應(yīng)給予高度重視。

     為全面協(xié)助臨床診斷,防止感染性疾病被漏診或誤診，現(xiàn)大部分醫(yī)院微生物檢驗(yàn)室開展厭氧菌鑒定與藥敏。

     要成功分離厭氧菌首先是正確地選擇標(biāo)本:下列細(xì)菌學(xué)指征有助于選擇標(biāo)本做厭氧培養(yǎng):（1）深部傷口或軟組織膿腫的膿液,特別是伴有惡臭或含有硫磺顆粒時(shí)。（2）可疑為氣性壞疽或少見的嚴(yán)重產(chǎn)氣或壞死性感染所取得的壞死組織或病灶清除材料。（3）粘膜部位的感染灶取得的材料。（4）從腦、肺、肝或其他器官的膿腫或從腹腔內(nèi)、肛周、隔下或其他部位的膿腫取得的材料。（5）無菌區(qū)感染灶的吸出液,包括血液、腦脊液、腹水、胸水、滑膜液或羊水等。（6）人或動物咬傷感染灶取得的材料。（7）變黑的或置于紫外線發(fā)紅色熒光的滲出物。（8）革蘭染色鏡下,觀察到具有厭氧菌*形態(tài)的材料。（9）可疑引起肉毒桿菌食物中毒的食物。

收集標(biāo)本及運(yùn)送對厭氧菌培養(yǎng)能否成功至關(guān)重要，須注意：標(biāo)本不能被正常菌群污染；應(yīng)盡量避免接觸空氣。

    正確地收集標(biāo)本:厭氧菌是人體許多部位（如皮膚、口咽部、腸道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分,因此下列材料無需做厭氧培養(yǎng):（1）咽、鼻、尿道、陰道或直腸拭子、牙拭子。（2）咳出的痰,通過支氣管鏡取的分泌物,排出或?qū)С龅哪颉⒓S便及胃內(nèi)容物。（3）前列腺分泌物。為排除或盡量減少正常菌群中厭氧菌的污染,用注射器抽取標(biāo)本比用拭子更好,特別適用于下列臨床情況:（1）從未開放的膿腫抽取膿液。（2）通過胸腔穿刺抽出的胸腔液。（3）尿（從恥骨聯(lián)合上方做膀胱穿刺吸出或從腎造口管收集）。（4）肺分泌物（氣管切開吸取）。（5）腹腔液（穿刺抽出）。（6）通過腰椎穿刺抽出腦脊液。（7）竇道標(biāo)本可插入小導(dǎo)管,用注射器吸出。也可自竇道損傷部位取材做活組織檢查。注射器和針頭內(nèi)的氣體應(yīng)全部排出，針頭插入無菌橡皮塞，隔絕空氣，即可送到實(shí)驗(yàn)室。如果必須使用拭子,應(yīng)盡快接種于適宜培養(yǎng)基中。在運(yùn)送過程中要保持厭氧狀態(tài)。培養(yǎng)基內(nèi)不應(yīng)含有肝素,因它會抑制細(xì)菌生長。

     實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后，在20～30分鐘內(nèi)接種標(biāo)本于厭氧培養(yǎng)基，并放入?yún)捬跸鋬?nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，置于37℃箱內(nèi)培養(yǎng)2～7天，每天觀察培養(yǎng)基上菌落生長情況，血液等液體直接接種于血液檢測儀培養(yǎng)基，血液檢測儀能快速檢出血液中厭氧菌。挑取可疑菌落作鑒定與藥敏試驗(yàn)，使用微量生化系統(tǒng)鑒定待測菌或冷藏長期存儲。

    厭氧菌作為重要的條件致病菌,所致感染已日益受到關(guān)注。很多醫(yī)院微生物室（如深圳第二人民醫(yī)院、深圳港大醫(yī)院、深圳福田醫(yī)院、深圳骨科醫(yī)院、深圳孫逸仙醫(yī)院、廣東省人民醫(yī)院、中山大學(xué)附屬口腔醫(yī)院、中山大學(xué)附屬*醫(yī)院、中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院、南方醫(yī)院、廣州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、廣州市第二人民醫(yī)院、廣州第八人民醫(yī)院等等）與深圳華大基因研究院等機(jī)構(gòu)合作開展厭氧菌鑒定與藥敏試驗(yàn)，迅速協(xié)助臨床對厭氧菌感染及時(shí)作出診斷與選擇有效的用藥方案。