SW480細胞*人結(jié)腸癌細胞株

產(chǎn)品名稱：SW480人結(jié)腸癌細胞

組織來源：人直腸；人結(jié)直腸腺癌

產(chǎn)品簡介：SW480細胞為人結(jié)腸腺癌細胞，來源于人直腸或結(jié)直腸腺癌，中文名為人結(jié)腸腺癌細胞，正常的細胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長。

特征特性：SW480源自一位51歲白人男性患者的原位直腸腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細胞CSAp和直腸抗原3陰性；角蛋白陽性；p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代；細胞p53蛋白表達水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性；未檢測到癌基因N-myc的表達；不表達Matrilysin（一種與腫瘤侵襲相關(guān)的金屬蛋白酶）。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1:2傳代，1-2天換液一次

凍存條件：90%FBS+10%DMSO

支原體檢測：陰性

生長培養(yǎng)基的PH值對細胞的增殖和病毒或重組蛋白的生產(chǎn)均會產(chǎn)生影響。對于大部分鱗翅類昆蟲細胞系，在PH值 6.0～6.4范圍的大部分應(yīng)用效果良好。培養(yǎng)鱗翅類昆蟲細胞系時，培養(yǎng)基的zui適滲透壓是345-380mOsm/kg.。為保證可靠和持久的細胞培養(yǎng)方式，減少技術(shù)問題，保持PH值和滲透壓在以上所列的范圍之內(nèi)。

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排除其他原因：如更換培養(yǎng)條件（血清、培養(yǎng)基等）；使用器皿的潔凈程度；

細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法。如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？

原則上：直接滅菌后丟棄之。

當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。

高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應(yīng)實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。

1.在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。

2.分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。

3.每天觀測細胞毒性指標(biāo)，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。

4.確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2～3代。

5.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。

6.重復(fù)步驟4。

7.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代，確定污染是否以已被消除。

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 °C 30~60 分鐘→ (-20 °C30 分鐘*) → -80 °C 16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 °C 至–80 °C 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 °C 不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80°C 冰箱中，惟存活率稍微 降低一些。

相關(guān)*培養(yǎng)基（）

（小瓶分裝，避免多次取用后pH值的改變，同時可減少污染的幾率）：

RPMI-1640*培養(yǎng)基 說明：RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

DMEM高糖*培養(yǎng)基 說明：DMEM高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

DMEM低糖*培養(yǎng)基 說明：DMEM低糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

DMEM/F12*培養(yǎng)基(含HEPES) 說明：DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

MEM*培養(yǎng)基 說明：MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

MEM α*培養(yǎng)基(含核苷、脫氧核苷) 說明：MEM α(含核苷、脫氧核苷)基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

MEM α*培養(yǎng)基(不含核苷、脫氧核苷) 說明：MEM α(不含核苷、脫氧核苷)基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

IMDM*培養(yǎng)基 說明：IMDM基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

McCoy's 5A*培養(yǎng)基(不含HEPES) 說明：McCoy's 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

Ham's F-12*培養(yǎng)基 說明：Ham's F-12基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

F12K*培養(yǎng)基 說明：F12K基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

L-15*培養(yǎng)基 說明：L-15基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清+1% 雙抗

另有原代細胞*培養(yǎng)基：

人肺微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

人肺大動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

人肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基

人肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

人肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基

人肺動脈成纖維細胞*培養(yǎng)基

人肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基

人氣管上皮細胞*培養(yǎng)基

人支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基

人小氣道上皮細胞*培養(yǎng)基 人肺成纖維細胞*培養(yǎng)基 人支氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 人小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基 人氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 人支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基

人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基

人乳腺上皮細胞*培養(yǎng)基 人乳腺成纖維細胞*培養(yǎng)基 人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 人胰島細胞*培養(yǎng)基 人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基 人前列腺成纖維細胞*培養(yǎng)基 人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基 人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基 人胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基 人淋巴內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基 人淋巴血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基 人外周血白細胞*培養(yǎng)基

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所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質(zhì)量檢測和鑒定

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