A431 A431細(xì)胞 細(xì)胞株
| 參考價 | ￥ 14 |
| 訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 生物試劑銷售中心
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產(chǎn)地 國外引進
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2020/8/5 11:24:34
- 訪問次數(shù) 1612
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產(chǎn)品名稱：A431 A431細(xì)胞 細(xì)胞株
代號：A431
中文名稱：人皮膚鱗癌細(xì)胞
生長狀態(tài)：貼壁生長|懸浮生長|半貼壁半懸浮生長
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣|成纖維樣|圓形|不規(guī)則
培養(yǎng)條件：DMEM|1640|MEM|IMDM+10% FBS
細(xì)胞規(guī)格：>5×100000cells/瓶.
特征特性：該細(xì)胞源自一位患有皮膚鱗狀細(xì)胞癌的85歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。該細(xì)胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克??；是一個超三倍體人細(xì)胞株。
傳代：1:3~1:8傳代；每2~3天換液1次。
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
運輸方式：運輸方式分為新鮮運輸和凍存管運輸兩種運輸方式
貨期：新鮮運輸需要1-2周，凍存管運輸?shù)男枰?/span>2-3天
慧穎細(xì)胞庫提供的所有細(xì)胞僅供科研使用
原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進行培 養(yǎng)；因此，較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。不同的原代細(xì)胞傳代次數(shù)不同，具體需咨詢客服人員或者自行查閱 相關(guān)資料。
細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培 養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講，理論上可培養(yǎng)到40-50代。
客戶應(yīng)具有一定細(xì)胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗，并具備基本培養(yǎng)條件（細(xì)胞培養(yǎng)實驗室，無菌操作臺、CO2培養(yǎng)箱，可拍照倒置顯微鏡等），并按說明書要求準(zhǔn)備好相應(yīng)的無菌的培養(yǎng)基、血清、雙抗、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板等。如果因客戶缺少基本培養(yǎng)經(jīng)驗和培養(yǎng)條件而導(dǎo)致細(xì)胞死亡或污染，不在我司售后責(zé)任之內(nèi)。
潔凈區(qū)，并不是沒有細(xì)菌，而是細(xì)菌的數(shù)量非常少，國家標(biāo)準(zhǔn)100級的潔凈標(biāo)準(zhǔn)是浮游菌數(shù)不得超過5個每立方米，沉降菌數(shù)不得超過1個每培養(yǎng)皿.而國外的標(biāo)準(zhǔn)比我國的還要高一點，要求的數(shù)量更少。在我們的潔凈操作臺里，并不是真正一個細(xì)菌都沒有的，所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進入培養(yǎng)體系細(xì)菌的數(shù)量。 處理細(xì)菌污染的重要原則就是：無限地稀釋細(xì)菌的濃度，無限地減少細(xì)菌的數(shù)量！ 1）.將污染的培養(yǎng)液倒掉，轉(zhuǎn)燒瓶口，加入10mlPBS，適當(dāng)晃動清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。 2）.繼續(xù)加入10mlPBS，同樣方法晃動，清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉。 3）.繼續(xù)加入5mlPBS，同樣方法洗瓶，主要是培養(yǎng)面，然后倒掉。 4）.重復(fù)步驟3再洗。 5）.重復(fù)步驟3再洗。 6）.加入3-5ml雙抗，洗瓶，靜置3-5分鐘，然后吸出。 7）.加入3ml雙抗，洗瓶，靜置3-5分鐘，然后吸出。 8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。 9）.加入10ml培養(yǎng)液，加入2ml雙抗，放置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，5小時之后，倒掉培養(yǎng)基，加入PBS洗瓶兩次，然后加入胰酶消化，吹打后置于離心機800-1000r/min離心，然后洗一次。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng)，培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。 10）.24h之后，視情況換液，若仍然污染嚴(yán)重，培養(yǎng)基渾濁，重復(fù)以上步驟，若看不到污染物，則繼續(xù)步驟1)、3）、4）、6）、8），然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng)，培養(yǎng)體系加入2ml雙抗. 11).24h之后，若仍污染嚴(yán)重，可再重復(fù)一次，若還污染只能棄之（不過一般沒有出現(xiàn)這種情況），若鏡下不見污染物，則換液PBS洗瓶，正常培養(yǎng)。 以上是對于細(xì)菌污染（常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌）；若為霉菌或者真菌污染，加入兩性霉素B清洗和培養(yǎng)，終濃度一般為2.5μg/ml（在30μg/ml時會有細(xì)胞毒性）。另外也可以選擇在培養(yǎng)基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D。其它操作同；若為支原體或者黑膠蟲污染，基本上都是重新弄細(xì)胞了。對于黑膠蟲污染，我們會預(yù)防為主?；旧系聡?/span>SERANA胎牛血清、GIBCO胎牛血清中不含黑膠蟲，我們建議購買！以上方法主要是針對貼壁生長A431 A431細(xì)胞 細(xì)胞株，在操作的過程中，一定要小心操作動作，輕柔緩慢，切忌大動作魯莽。防止細(xì)胞脫落。
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：張昕
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