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          AC11L054 CCK-8試劑盒(Cell Counting Kit-8)

          參考價(jià) 140
          訂貨量 ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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            公司前身為上海李記生物科技有限公司,成立于2015年。和元李記在2023年由和元生物和李記生物合資成立,是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售為一體的國(guó)產(chǎn)生物試劑公司,專(zhuān)注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,致力于為客戶(hù)提供技術(shù)優(yōu)秀 、方便易用、經(jīng)濟(jì)高效的產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍包括:細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)試劑及試劑盒。

            目前在全國(guó)40余座城市均有授權(quán)代理;直接服務(wù)終端超千家,涵蓋CRO、藥企、高校、醫(yī)院和科研院所;李記產(chǎn)品已幫助客戶(hù)發(fā)表數(shù)百篇SCI,多篇CNS。

            優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品:蛋白Marker、EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑、CCK-8、支原體快速檢測(cè)試劑盒、核酸染料(GelRed/GelGreen)、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒等。

          胎牛血清,轉(zhuǎn)染試劑(高效),凍存液(普通),cck-8,1640培養(yǎng)基,PBS液體,凋亡試劑盒,熒光素鉀鹽,蛋白Mark,發(fā)光液(超敏),快速封閉

          CAS / 純度 /
          分子量 / 分子式 /
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20*500T
          貨號(hào) AC11L054 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 用于細(xì)胞增殖測(cè)定,細(xì)胞毒性的檢測(cè),藥物篩選,以及細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)等。
          產(chǎn)品描述

            Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒),是一種基于WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度比色檢測(cè)試劑盒。檢測(cè)原理為:WST-8在電子耦合劑1-Methoxy PMS存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan,參考圖1),生成的甲臜的顏色深淺與細(xì)胞增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定OD 值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
            本產(chǎn)品可用于細(xì)胞增殖測(cè)定,細(xì)胞毒性的檢測(cè),藥物篩選,以及細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)等。


          CCK-8試劑盒(Cell Counting Kit-8)
          圖1:WST-8分子結(jié)構(gòu)及檢測(cè)原理

          訂購(gòu)信息

          產(chǎn)品名稱(chēng)貨號(hào)規(guī)格價(jià)格
          CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒AC11L054500T140
          CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒AC11L0542*500T240
          CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒AC11L05420*500T1500

          運(yùn)輸與保存
          藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃短期保存,有效期3個(gè)月;-20℃長(zhǎng)期保存,有效期24個(gè)月?!咀ⅰ浚悍磸?fù)凍融會(huì)造成測(cè)定背景OD值升高。
          使用方法

          1. 以96孔板為例,96孔板中每孔接種100 μL的細(xì)胞懸液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24 h。

          2. 向每孔加入10 μL不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。如果僅測(cè)定細(xì)胞活性,則不需要2~3步驟,直接從第四步操作。

          3. 將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間 (依據(jù)待測(cè)藥物而定)。

          4. 向每孔加入10 μL CCK-8溶液 (注意不要產(chǎn)生氣泡,輕輕混勻)。

          5. 將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育適當(dāng)時(shí)間(一般0.5~2 h)。

          6. 酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm處的吸光值。

          注意事項(xiàng)

          1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

          2. 建議調(diào)試合適的接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8溶液后培養(yǎng)的時(shí)間。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96 孔板時(shí),貼壁細(xì)胞至少1000 個(gè)/ 孔(100 μL 培養(yǎng)基),白細(xì)胞至少2500 個(gè)/ 孔(100 μL 培養(yǎng)基)。建議實(shí)驗(yàn)前設(shè)定幾個(gè)不同細(xì)胞數(shù)量的梯度孔進(jìn)行條件測(cè)試,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間和處理方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況而定,加入CCK-8溶液后(加入體積為每孔細(xì)胞培養(yǎng)液體積的10%),在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育,不同時(shí)間點(diǎn)后測(cè)450 nm處的吸光值(CCK-8敏感性高,一些細(xì)胞0.5 h后就可以測(cè)定第一次)。

          3. CCK-8試劑盒的檢測(cè)依賴(lài)于脫氫酶催化反應(yīng),如果待檢測(cè)體系中有較多還原劑(或抗氧化劑)會(huì)造成背景OD值升高,干擾檢測(cè)結(jié)果。如果實(shí)驗(yàn)中有還原劑,請(qǐng)檢查背景的OD值,設(shè)法先去除還原劑干擾。例如,可在加入CCK-8溶液之前更換新鮮的培養(yǎng)基,以去除待測(cè)藥物的影響。當(dāng)待測(cè)藥物影響比較小時(shí),可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入待測(cè)藥物后的空白吸收即可。

          4. 進(jìn)行藥物抑制實(shí)驗(yàn)時(shí),如果藥物中含有金屬,如Pb2+、Fe2+、Cu2+等金屬會(huì)對(duì)CCK-8 Solution的顯色反應(yīng)產(chǎn)生影響,從而導(dǎo)致檢測(cè)的靈敏度降低。

          5. 如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化,應(yīng)洗滌細(xì)胞更換培養(yǎng)基后再加CCK-8檢測(cè)。細(xì)胞培養(yǎng)基酚紅不影響測(cè)定結(jié)果。

          6. 為使CCK-8試劑盒培養(yǎng)基充分混勻,減少CCK-8在移液器上的殘留,建議加樣前用培養(yǎng)基稀釋CCK-8試劑,混勻后加樣。

          7. 若暫時(shí)不測(cè)定OD值,可以向每孔中加入0.1 M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS 溶液,室溫避光保存,24 h 內(nèi)檢測(cè),吸光度不會(huì)受到影響。(加入1% SDS 溶液的體積與加入CCK-8溶液的體積相同)。

          8. 如果吸光值很低,可以適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或者延長(zhǎng)加入CCK-8溶液后孵育的時(shí)間。

          9. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

          CCK-8法的優(yōu)勢(shì)

          檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK-8法
          產(chǎn)品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液
          使用方法配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用即開(kāi)即用即開(kāi)即用
          檢測(cè)靈敏度很高很高
          檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)較短較短最短
          檢測(cè)波長(zhǎng)560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm
          細(xì)胞毒性高,細(xì)胞形態(tài)*消失很低,細(xì)胞形態(tài)不變很低,細(xì)胞形態(tài)不變很低,細(xì)胞形態(tài)不變
          試劑穩(wěn)定性一般較差一般很好
          批量樣品檢測(cè)可以非常適合非常適合非常適合
          便捷程度一般便捷便捷非常便捷


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