AC11L054 CCK-8試劑盒(Cell Counting Kit-8)
參考價(jià) | ¥ 140 |
訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱(chēng) 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) AC11L054
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/8/6 18:44:14
- 訪問(wèn)次數(shù) 3807
CCK-8cck-8說(shuō)明書(shū)cck-8價(jià)格cck-8實(shí)驗(yàn)步驟cck-8試劑盒
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胎牛血清,轉(zhuǎn)染試劑(高效),凍存液(普通),cck-8,1640培養(yǎng)基,PBS液體,凋亡試劑盒,熒光素鉀鹽,蛋白Mark,發(fā)光液(超敏),快速封閉
CAS | / | 純度 | / |
---|---|---|---|
分子量 | / | 分子式 | / |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20*500T |
貨號(hào) | AC11L054 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 用于細(xì)胞增殖測(cè)定,細(xì)胞毒性的檢測(cè),藥物篩選,以及細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)等。 |
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒),是一種基于WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度的比色檢測(cè)試劑盒。檢測(cè)原理為:WST-8在電子耦合劑1-Methoxy PMS存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan,參考圖1),生成的甲臜的顏色深淺與細(xì)胞增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定OD 值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
本產(chǎn)品可用于細(xì)胞增殖測(cè)定,細(xì)胞毒性的檢測(cè),藥物篩選,以及細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)等。
圖1:WST-8分子結(jié)構(gòu)及檢測(cè)原理
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒 | AC11L054 | 500T | 140 |
CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒 | AC11L054 | 2*500T | 240 |
CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒) | AC11L054 | 20*500T | 1500 |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃短期保存,有效期3個(gè)月;-20℃長(zhǎng)期保存,有效期24個(gè)月?!咀ⅰ浚悍磸?fù)凍融會(huì)造成測(cè)定背景OD值升高。
使用方法
以96孔板為例,96孔板中每孔接種100 μL的細(xì)胞懸液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24 h。
向每孔加入10 μL不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。如果僅測(cè)定細(xì)胞活性,則不需要2~3步驟,直接從第四步操作。
將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間 (依據(jù)待測(cè)藥物而定)。
向每孔加入10 μL CCK-8溶液 (注意不要產(chǎn)生氣泡,輕輕混勻)。
將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育適當(dāng)時(shí)間(一般0.5~2 h)。
酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm處的吸光值。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
建議調(diào)試合適的接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8溶液后培養(yǎng)的時(shí)間。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96 孔板時(shí),貼壁細(xì)胞至少1000 個(gè)/ 孔(100 μL 培養(yǎng)基),白細(xì)胞至少2500 個(gè)/ 孔(100 μL 培養(yǎng)基)。建議實(shí)驗(yàn)前設(shè)定幾個(gè)不同細(xì)胞數(shù)量的梯度孔進(jìn)行條件測(cè)試,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間和處理方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況而定,加入CCK-8溶液后(加入體積為每孔細(xì)胞培養(yǎng)液體積的10%),在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育,不同時(shí)間點(diǎn)后測(cè)450 nm處的吸光值(CCK-8敏感性高,一些細(xì)胞0.5 h后就可以測(cè)定第一次)。
CCK-8試劑盒的檢測(cè)依賴(lài)于脫氫酶催化反應(yīng),如果待檢測(cè)體系中有較多還原劑(或抗氧化劑)會(huì)造成背景OD值升高,干擾檢測(cè)結(jié)果。如果實(shí)驗(yàn)中有還原劑,請(qǐng)檢查背景的OD值,設(shè)法先去除還原劑干擾。例如,可在加入CCK-8溶液之前更換新鮮的培養(yǎng)基,以去除待測(cè)藥物的影響。當(dāng)待測(cè)藥物影響比較小時(shí),可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入待測(cè)藥物后的空白吸收即可。
進(jìn)行藥物抑制實(shí)驗(yàn)時(shí),如果藥物中含有金屬,如Pb2+、Fe2+、Cu2+等金屬會(huì)對(duì)CCK-8 Solution的顯色反應(yīng)產(chǎn)生影響,從而導(dǎo)致檢測(cè)的靈敏度降低。
如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化,應(yīng)洗滌細(xì)胞更換培養(yǎng)基后再加CCK-8檢測(cè)。細(xì)胞培養(yǎng)基酚紅不影響測(cè)定結(jié)果。
為使CCK-8試劑盒培養(yǎng)基充分混勻,減少CCK-8在移液器上的殘留,建議加樣前用培養(yǎng)基稀釋CCK-8試劑,混勻后加樣。
若暫時(shí)不測(cè)定OD值,可以向每孔中加入0.1 M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS 溶液,室溫避光保存,24 h 內(nèi)檢測(cè),吸光度不會(huì)受到影響。(加入1% SDS 溶液的體積與加入CCK-8溶液的體積相同)。
如果吸光值很低,可以適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或者延長(zhǎng)加入CCK-8溶液后孵育的時(shí)間。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
CCK-8法的優(yōu)勢(shì)
檢測(cè)方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 |
產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開(kāi)即用 | 即開(kāi)即用 |
檢測(cè)靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
檢測(cè)時(shí)間 | 較長(zhǎng) | 較短 | 較短 | 最短 |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
細(xì)胞毒性 | 高,細(xì)胞形態(tài)*消失 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 |
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
批量樣品檢測(cè) | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
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