使用對象

IAC-SEP^®玉米赤霉烯酮免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的玉米赤霉烯酮。玉米赤霉烯酮免疫親和柱廣泛地應(yīng)用于糧食、食品、飼料、堅(jiān)果、花生、醬油、醋、辣椒、胡椒、藥材和酒類等樣品的提取，該方法速度快、操作簡單、準(zhǔn)確性高，對準(zhǔn)確靈敏的測定樣品中的玉米赤霉烯酮起到十分重要的作用。

IAC-SEP^®玉米赤霉烯酮免疫親和柱適用于以下標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T 23504-2009 食品中玉米赤霉烯酮的測定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法

GB/T 5009.209-2008 谷物中玉米赤霉烯酮的測定

SN/T 1172-2006 進(jìn)出口糧谷中玉米赤霉烯酮的測定免疫親和柱-液相色譜法

SN/T 1175-2006 進(jìn)出口大豆油菜籽和食用植物油中玉米赤霉烯酮的測定

原理

樣品經(jīng)甲醇+水提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有玉米赤霉烯酮特殊抗體的免疫親和柱。此時，玉米赤霉烯酮被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將玉米赤霉烯酮從親和柱上洗脫下來。zui后，用HPLC或熒光計(jì)進(jìn)行定量檢測。

儲存條件

該親和柱保存在2-8 °C條件下，不能冷凍，保質(zhì)期為18個月。建議在室溫（18-30°C）下使用。

實(shí)驗(yàn)溶液制備

提取液，乙腈/水（8+2）：取80mL乙腈加20mL水，混合均勻。

        乙腈/水（9+1）：取90mL甲醇加10mL水，混合均勻。

HPLC流動相，乙腈/水/甲醇（46+46+8）：取460mL乙腈和80mL甲醇于1L容量瓶中，用純水定容至1L，用0.22微米的尼龍篩過濾。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)儲備液，流動相為稀釋液，配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。例如：取100uL標(biāo)準(zhǔn)品儲備液10ug/mL于10mL容量瓶中，用流動相定容至10mL，那么，玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)品濃度為100ng/mL             

 注：配制好的標(biāo)準(zhǔn)品溶液有效期為7天。

pH 7.0 PBS溶液：稱取8.0g氯化鈉，1.44g磷酸氫二鈉，0.24g磷酸二氫鉀，0.2g氯化鉀，用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0，zui后用純水稀釋至1000mL。

液相色譜條件

色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）

流動相：乙腈/水/甲醇（46+46+8）

流速：0.8mL/min

檢測器：熒光檢測器，激發(fā)波長274nm,發(fā)射波長440nm; 紫外檢測器，265nm

進(jìn)樣體積：20~100uL