高通量細(xì)胞成像微孔板檢測(cè)儀,細(xì)胞成像微孔板檢測(cè)儀

。DIMSCAN利用FDA染料在活細(xì)胞內(nèi)聚集的特性結(jié)合半自動(dòng)數(shù)字影像熒光顯微鏡定量，依據(jù)減去背景后的FDA熒光強(qiáng)度來(lái)定量存活細(xì)胞相對(duì)數(shù)量，在4個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)范圍內(nèi)提供存活細(xì)胞與熒光強(qiáng)度良好的線性關(guān)系，與MTS的2個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)檢測(cè)范圍相比，具有更高的敏感性。

DIMSCAN是先在洛杉磯兒童醫(yī)院的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)，由于其優(yōu)異的靈敏度和體外微孔細(xì)胞毒性試驗(yàn)可達(dá)到>4 logs的線性關(guān)系，所以一經(jīng)推出，就得到了世界的認(rèn)可。由于DIMSCAN測(cè)量細(xì)胞數(shù)量上下限可以在10000倍以上（比如zui小可以檢測(cè)10個(gè)細(xì)胞， zui大則可以測(cè)量10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞以上），DIMSCAN系統(tǒng)對(duì)存活細(xì)胞定量觀察線性回歸達(dá)到了驚人的R2= 0.99967 ± 0.0003 ，所以非常寬的動(dòng)態(tài)范圍以及高精準(zhǔn)的敏感度給予了DIMSCAN在細(xì)胞毒理學(xué)研究、藥理學(xué)研究和細(xì)胞生物學(xué)研究較高的應(yīng)用價(jià)值。該系統(tǒng)已被證明是對(duì)各種細(xì)胞類型，包括正常的淋巴細(xì)胞、白血病細(xì)胞系、各種實(shí)體腫瘤細(xì)胞，或者對(duì)貼壁以及懸浮培養(yǎng)細(xì)胞都可以應(yīng)用。

用DIMSCAN測(cè)定系統(tǒng)測(cè)定細(xì)胞毒性，此系統(tǒng)使用數(shù)字成像顯微鏡測(cè)定6至384孔培養(yǎng)板每孔中計(jì)數(shù)活細(xì)胞的個(gè)數(shù)，活細(xì)胞選擇性地積聚熒光黃二醋酸鹽變成亮色的熒光。此系統(tǒng)能通過(guò)用曙紅Y淬滅已死亡或?yàn)l臨死亡的細(xì)胞的殘存熒光，并用數(shù)字閾測(cè)定活細(xì)胞的總熒光，而在4-5個(gè)數(shù)量級(jí)動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)4到7天測(cè)定細(xì)胞毒性。所測(cè)定的熒光與活細(xì)胞數(shù)量成正比。將經(jīng)藥物治療的細(xì)胞群體的總熒光和相似數(shù)量的未經(jīng)治療的細(xì)胞的熒光對(duì)比，得出存活率。

2、系統(tǒng)亮點(diǎn)概述

DIMSCAN是用于在組織培養(yǎng)板中定量的相對(duì)細(xì)胞數(shù)半自動(dòng)數(shù)字圖像顯微術(shù)系統(tǒng)。使用熒光素二乙酸酯（FDA）通過(guò)DIMSCAN測(cè)定細(xì)胞毒性測(cè)定法中，染料在活細(xì)胞選擇性地累積，利用集落形成測(cè)定法，可以實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)范圍在4至7天內(nèi)的生長(zhǎng)曲線。

（1）活細(xì)胞的相對(duì)數(shù)目是通過(guò)測(cè)算熒光素二乙酸酯（FDA）的熒光強(qiáng)度，削減由背景熒光的閾值和由曙紅所終止的不可存活的細(xì)胞的熒光值進(jìn)行測(cè)量。

（2）可以使用6至384個(gè)孔的矩形培養(yǎng)板，對(duì)于96孔板平均掃描時(shí)間為6分鐘。

（3）系統(tǒng)采用了基于自相關(guān)函數(shù)的自動(dòng)聚焦功能以zui大限度地提高了系統(tǒng)的自動(dòng)化的程度。

（4）相關(guān)程序存儲(chǔ)重新掃描過(guò)程中的圖像，并在用戶掃描結(jié)束時(shí)顯示出來(lái)，至今進(jìn)行新的掃描過(guò)程。

（5）具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，細(xì)胞數(shù)量在1, 10, 20, 50, 100, 200, 500, 1000, 2000, 5000和10000 每個(gè)培養(yǎng)孔，測(cè)量8個(gè)重復(fù)，細(xì)胞數(shù)量與熒光強(qiáng)度呈良好的線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)為0.9996746375