細胞名稱  人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞；MuM-2B培養(yǎng)
形態(tài)特性 多角

品牌 貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；20mM Hepes

傳代方法 1：

3傳代；2~3天1次。  

傳代情況 P21

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR

同工酶

染色體

使用權限 A類

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞；MuM-2B培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-TNF-alpha/ TNF- Alpha /FITC 熒光素標記鼠抗人壞死因子-α單克隆抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PDGF-A 血小板源性生長因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 Anti-TIMP-2 0.1ml

5HT5A receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體5A抗體 0.2ml

E2F3 英文名稱： 轉錄因子E2F-3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Kidins220 (Ser918) 磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

PDGF-A 血小板源性生長因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標記畸胎瘤衍化生長因子抗體(表皮生長因子相關肽)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Defensin β1 防御素β1抗體 規(guī)格 0.1ml

Guinea pig IgG/Cy3 熒光素Cy3標記豚鼠IgG 0.1ml

phospho-LSP1 (Ser204) 英文名稱： 磷酸化白細胞F肌動蛋白結合蛋白抗體 0.1ml

頭包啦啶單克隆抗體 小鼠單抗 0.5

Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標記畸胎瘤衍化生長因子抗體(表皮生長因子相關肽)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
白脂素(Asprosin)ELISA試劑盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒，英文名：TFPI ELISA Kit白脂素(Asprosin)ELISA試劑盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒，英文名：TFPI ELISA KiISA Kit for Human Axin-2小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA試劑盒，英文名：AMY2A ELISA Kit人膜聯(lián)蛋白-A4(Anxa4)ELISA試劑盒人96T0.078-5 ng/mL小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒，英文名：VB12 ELISA KiISA Kit for Human Retinal dehydrogenase 1小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒，英文名：Hsp-40 ELISA Kit人存活素(Surv)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒，英文名：LFA-3/CD58 ELISA KiISA Kit for Human Beta-casein小鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒，英文名：MMP-9 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Axin-2小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA試劑盒，英文名：AMY2A ELISA Kit人巨噬唾液酸蛋白(Macrosialin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠鈣結合蛋白(CR)ELISA試劑盒，英文名：CR ELISA KiISA Kit for Human C-type lectin domain family 4 member E小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒，英文名：LIF ELISA Kit人Cathelicidin 抗菌肽(CAMP)ELISA試劑盒人96T125-8000 pg/mL小鼠V-Ha-Ras肉瘤病毒基因同源物(HRAS)ELISA試劑盒，英文名：HRAS ELISA KiISA Kit for Human Calcitonin小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒，英文名：17-OHCS ELISA Kit人小肌營養(yǎng)蛋白結合蛋白1 (Dysbindin)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒，英文名：CTSK ELISA KiISA Kit for Human L-dopachrome tautomerase小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)ELISA試劑盒，英文名：IGFBP1 ELISA Kit
改良Western及IP細胞裂解液 100ml

Phospho-ZAP70 (Tyr493) 英文名稱： 磷酸化zeta相關蛋白70抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser494) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DYX2/KIAA0319 英文名稱： 閱讀障礙相關蛋白DLX2抗體 0.2ml

SOD1 SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) Human
IL-11 人白介素-11Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CHK2 細胞周期檢測點激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NUMB 膜相關蛋白Numb抗體 規(guī)格 0.2ml

Acrylamide  100g

Phospho-TLK1(Ser695) 英文名稱： 磷酸化調節(jié)染色體組裝激酶1抗體 0.1ml

Cyclin G2 英文名稱： 周期素G2抗體 0.1ml

Anti-CHK2 細胞周期檢測點激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml