毛細(xì)管氣相色譜分析黃酒中的甜蜜素

氣相色譜分析、分離的科學(xué)方法，被廣泛應(yīng)用于人類生產(chǎn)生活的方方面面。 在上海泰特睿杰信息科技有限公司的運(yùn)營(yíng)中，正在努力淘汰舊觀念，落后的模式，加快個(gè)性化腳步，讓我們的新一代國(guó)產(chǎn)反控GC2030plus氣相色譜儀推廣到優(yōu)質(zhì)的企業(yè)中，以下由泰特儀器色譜技術(shù)人員主要介紹用毛細(xì)管氣相色譜分析黃酒中的甜蜜素。

黃酒是我國(guó)的傳統(tǒng)釀造酒。保持適度甜味的黃酒可以給人甘醇、綿甜的愉悅感，而一些企業(yè)為改善口感，在勾兌黃酒時(shí)非法添加甜蜜素。近在各地組織黃酒抽檢中，都有檢測(cè)出非法添加甜蜜素的報(bào)道。

甜蜜素(環(huán)己基氨基磺酸鈉)是一種無營(yíng)養(yǎng)的合成甜味劑，甜度是蔗糖的50倍，且具有良好的水溶性和穩(wěn)定性，是一種優(yōu)良的甜味劑。鑒于其可能致癌，目前世界上許多國(guó)家都禁止使用，我國(guó)對(duì)甜蜜素也有*，其中釀造酒中不允許添加甜蜜素。

由于甜蜜素在紫外區(qū)域具有微弱的紫外吸收，目前國(guó)標(biāo)和文獻(xiàn)中所報(bào)道的方法多為用亞硝酸鈉分解食品中的甜蜜素，產(chǎn)生的環(huán)己醇在硫酸介質(zhì)中繼續(xù)與亞硝酸鈉作用，生成環(huán)己醇亞硝酸酯，再用氣相或液相分析。但在黃酒發(fā)酵過程中產(chǎn)生的環(huán)己醇類似物會(huì)對(duì)結(jié)果造成干擾。本檢測(cè)方法在國(guó)標(biāo)的基礎(chǔ)上對(duì)前處理方法進(jìn)行改進(jìn)，能有效消除測(cè)定結(jié)果中出現(xiàn)假陽性的可能，可用于測(cè)定黃酒中的甜蜜素。

1 儀器和設(shè)備

泰特氣相色譜儀器，帶FID檢測(cè)器；離心機(jī)；電子天平；正己烷(色譜純)、氯化鈉(分析純)、硫酸(分析純)、亞硝酸鈉(分析純)，三重蒸餾水；標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品用三重蒸餾水配制成10 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

2 色譜分析條件

色譜柱：氣相色譜采用HP-5毛細(xì)管柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm(膜厚)；分流 /不分流進(jìn)樣口，進(jìn)樣口溫度 200℃，分流比：20∶1；載氣：高純氮，載氣流速：1.5mL/min；程序升溫：200℃保持4 min，以50℃/min升至150℃；檢測(cè)器溫度 300℃，燃?xì)猓?0mL/min，助燃?xì)猓?00mL/min，尾吹：25 mL/min。

3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別準(zhǔn)確吸取10mg/mL甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL 于 100 mL 聚乙烯離心管中，加水至20 mL，置冰浴中，按照1.4的方法自“加入5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液…”起操作，分別相當(dāng)于甜蜜素的終濃度為 0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL。每個(gè)濃度做5個(gè)平行，取平均值。以甜蜜素的濃度為橫坐標(biāo)(X)，相對(duì)應(yīng)的平均峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，做線性回歸，并繪制回歸圖。

4 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取20.00 g黃酒樣品于蒸發(fā)皿中，在沸水浴上蒸發(fā)干。用10 mL的三重蒸餾水分多次溶解、轉(zhuǎn)移樣品于100 mL具塞聚乙烯離心管中，置冰浴中，依次加入事先冰浴過的5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液和5 mL 100 g/L硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30 min，并搖動(dòng)，然后準(zhǔn)確加入10 mL的正己烷和5 g氯化納，充分搖動(dòng)2 min，5000 r/min離心5 min，取上層正己烷層進(jìn)行氣相分析。

黃酒樣品前處理過程中，去除酒精等醇類物質(zhì)是關(guān)鍵步驟，但是樣品酒精是否除盡，還沒有確切的判斷標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)有的關(guān)于前處理中除酒精和雜質(zhì)的文獻(xiàn)報(bào)道也都很籠統(tǒng)，具體對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有干擾，不能確定。鑒于甜蜜素具有較好的熱穩(wěn)定性，采用直接將樣品蒸發(fā)干，這樣就能將大部分干擾物質(zhì)去除，而對(duì)目標(biāo)分析物沒任何損失。

甜蜜素的衍生化反應(yīng)必須全程在冰浴條件下進(jìn)行，所有的試劑通過冰浴處理后，能夠提高衍生產(chǎn)物環(huán)己醇亞硝酸酯的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)表明，試劑冰浴后的峰面積比不冰浴的峰面積大，環(huán)己醇亞硝酸酯后面的小峰幾乎沒有，曾有報(bào)道后面的小峰是環(huán)己醇亞硝酸酯的分解產(chǎn)物。樣品處理后需置于冰浴中至少8 h，環(huán)己醇亞硝酸酯幾乎不分解，可不予處理，其會(huì)迅速分解。樣品離心能加速正己烷層的分層，而且能有效防止乳化。

本文建立了分析黃酒中的甜蜜素的方法。先使樣品通過沸水浴蒸發(fā)干后，在硫酸介質(zhì)中與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成環(huán)己醇亞硝酸酯，后用毛細(xì)管柱分離，GC-FID檢測(cè)甜蜜素含量。結(jié)果表明，本方法線性范圍為0.1～2.0 mg/mL，醉底檢出限為2 mg/kg，加標(biāo)回收率為95.4%～113.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.34%～4.84%。該方法操作簡(jiǎn)便、快速、精密度好、準(zhǔn)確度高，比較適合用于黃酒中甜蜜素含量的測(cè)定。