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AltairCHO® Medium 全新化學(xué)成分確定CHO細(xì)胞培養(yǎng)基惠誠(chéng)現(xiàn)貨
- 公司名稱(chēng) 上?;菡\(chéng)生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) AltairCHO® Medium
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2023/9/25 9:44:01
- 訪問(wèn)次數(shù) 537
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | C673017 |
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全新化學(xué)成分確定CHO細(xì)胞培養(yǎng)基惠誠(chéng)現(xiàn)貨AltairCHO® Medium
AltairCHO™是完(空格)全化學(xué)成分確定(Chemically-defined)基礎(chǔ)培養(yǎng)基,不含水解物、蛋白、生長(zhǎng)因子及任何動(dòng)物來(lái)源的成分,適合于不同亞型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO-K1、CHO DG44 和 CHO-S 細(xì)胞)的高密度懸浮培養(yǎng),可實(shí)現(xiàn)重組蛋白和抗體的高水平表達(dá)。AltairCHO?基礎(chǔ)培養(yǎng)基與全新一代高性能補(bǔ)料AltairCHO™Feed或 VegaCHO™ Feed 聯(lián)用,可支持細(xì)胞高密度生長(zhǎng)及活率維持,實(shí)現(xiàn)更高水平的蛋白/抗體表達(dá)和質(zhì)量。
應(yīng)用范圍
AltairCHO™ 可應(yīng)用于 CHO 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代以及高密度流加培養(yǎng)。該基礎(chǔ)培養(yǎng)基適用于科研和基于細(xì)胞培養(yǎng)的大規(guī)模生物制品的生產(chǎn),但不可直接用于人體或作為藥物使用。
儲(chǔ)存:2~8℃冷藏,干燥避光保存
運(yùn)輸:常溫(液體)、冷藏(干粉)
液體培養(yǎng)基配制方法
AltairCHO? 培養(yǎng)基不含谷氨(空格)酰胺和碳酸(空格)氫鈉。
1. 取最終配制體積 90%的超純水,水溫 25~35°C(注:一次性配制體積不低于 1L);
2. 稱(chēng)量 19.65 g/L 干粉培養(yǎng)基,緩慢加入水中并攪拌,待粉末完(空格)全分散后,再繼續(xù)攪拌10 分鐘,容器邊緣殘留干粉應(yīng)將其全部沖入;
3. 稱(chēng)量 2.22g/L 碳酸(空格)氫鈉,加入水中并攪拌;
4. 緩慢加入 5N NaOH 調(diào)節(jié) pH 到 8.3~8.5,攪拌 20~30 分鐘,此時(shí)應(yīng)完(空格)全溶解;
5. 緩慢加入 5N HCl 將 pH 調(diào)回至 7.0;
6. 加超純水定容到最終配液體積,繼續(xù)攪拌 5 分鐘,測(cè) pH,用 5N NaOH 或 5N HCl 將pH 調(diào)至7.0;
7. 取樣測(cè)滲透壓,加入 NaCl 調(diào)節(jié)滲透壓至 285±10 mOsm/kg(滲透壓計(jì)算公式:NaCl 添加量(g)=配液體積(L)×(285-檢測(cè)值)/ 31.5);
8. 繼續(xù)攪拌 10 分鐘,無(wú)菌過(guò)濾到合適容器
培養(yǎng)條件
溫度 37℃,濕度 80%,5~8% CO2
搖床設(shè)置:轉(zhuǎn)速 110~150 rpm(振幅 50 mm)
細(xì)胞復(fù)蘇
1. 在 37℃水浴中快速(<2 min)融化冷凍的細(xì)胞;
2. 將冷凍管中的細(xì)胞液全部轉(zhuǎn)移到 125 mL 含有 30mL 預(yù)溫過(guò)的 AltairCHO™ 培養(yǎng)基的搖瓶中;
3. 放入 37℃,5~8% CO2,轉(zhuǎn)速 110~130 rpm(振幅 50 mm),濕度 80%的搖床中培養(yǎng);
4. 細(xì)胞至少傳代 2 次,待其完(空格)全復(fù)蘇,細(xì)胞倍增時(shí)間(Population Doubling Time,PDT)穩(wěn)定后,可按計(jì)劃進(jìn)行后續(xù)操作。
全新化學(xué)成分確定CHO細(xì)胞培養(yǎng)基惠誠(chéng)現(xiàn)貨AltairCHO® Medium
細(xì)胞傳代
1. 將 AltairCHOTM培養(yǎng)基放入 37℃條件下預(yù)熱 20-30 min;
2. 取細(xì)胞密度≥1×106 cells/ml、活率≥90%、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中期的細(xì)胞進(jìn)行傳代;
3. 按接種密度為 0.5×106 ~ 1.0×106 cells/L 的最終傳代體積,計(jì)算所需種子液量;
4. 無(wú)菌轉(zhuǎn)移所需量的種子液,添加至含所需體積的已預(yù)熱的 AltairCHOTM培養(yǎng)基的搖瓶中;
5. 將搖瓶放入溫度 37℃,濕度 80%,轉(zhuǎn)速 110~150 rpm(振幅 50 mm),5%~8% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)搖床中進(jìn)行培養(yǎng); 6. 每 2~3 天用新鮮的培養(yǎng)基按上述步驟進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
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