人波形蛋白(VIM)試劑盒

類別簡(jiǎn)介:"專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、細(xì)胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高， 代做ELISA實(shí)驗(yàn)等。"

供應(yīng)商 :乾思生物

貨期 :7-10天

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分： (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)； (2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)； (3)酶的底物； (4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中)； (5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液； (6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水； (7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。主要包括37000多種一抗，1689種二抗，61種標(biāo)簽和標(biāo)記物及42種試驗(yàn)小包裝產(chǎn)品。（部分產(chǎn)品如下表）
一抗主要涉及抗人、小鼠、大鼠和兔的多種抗體，以兔抗為主，適用于ELISA，WB和IHC-P等試驗(yàn)。為客戶利益著想還特別提供了幾十種常用抗體的20μg試驗(yàn)小包裝。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)：熒光定量pcr服務(wù)、hplc(高效液相色譜法檢測(cè))服務(wù)、emsa(凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn))、酶聯(lián)免疫(elisa)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、免疫組化(ihc)技術(shù)服務(wù)、rna干擾(sirna,miran)、雙向電泳、免疫共沉淀、科研整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)、流式細(xì)胞檢測(cè)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、四甲基偶氮唑鹽比色法(mtt方法、sci生物醫(yī)學(xué)論文服務(wù)、熒光原位雜交fish服務(wù)、載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、抑制性消減雜交(ssh)技術(shù)服務(wù)、單核苷酸多態(tài)性分析(snp)檢測(cè)服務(wù)、real-timepcr實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。

◇      液體類標(biāo)本:標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測(cè)種類。

◇      血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      尿液、胸腹水、腦脊液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。注：（1）各種試劑禁忌常年續(xù)加；

（2）同一品牌不同批號(hào)的試劑不能混用；
（3）續(xù)加試劑后要重新定標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)液即開即用；
（4）不同廠家的試劑禁用同一標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)；
（5）質(zhì)控必須用高、中、低值三個(gè)樣本每天隨患者標(biāo)本測(cè)定；
(6) 抗凝劑的使用；
(7) 校準(zhǔn)液的正確使用。如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。