PEG/LiAc配套試劑
參考價(jià) | ¥45.00-¥360.00 |
- 公司名稱(chēng) 青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號(hào)
- 所在地上海市
- 廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)廠(chǎng)家
- 更新時(shí)間2022/1/21 14:49:28
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 1448
5ml/支 | 45.00元 | 9999 臺(tái) 可售 |
50ml/瓶 | 360.00元 | 9999 臺(tái) 可售 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5ml/支/50ml/瓶 |
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貨號(hào) | BFNC86200 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅用于科研 |
PEG/LiAc配套試劑
● 產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 保存 |
PEG/LiAC | BFNC86200-01 | 5 ml | 4℃, 12個(gè)月 |
PEG/LiAC | BFNC86200-02 | 50 ml | 4℃, 12個(gè)月 |
● 產(chǎn)品說(shuō)明
PEG是一種高分子聚合物,只有分子量達(dá)到3000左右的PEG才會(huì)發(fā)揮大的轉(zhuǎn)化促進(jìn)作用。
酵母感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化所需PEG分子量為4000,可促進(jìn)酵母轉(zhuǎn)化效率達(dá)到103-105 cfu/μgDNA。PEG在酵母轉(zhuǎn)化中起到在高濃度LiAc環(huán)境中保護(hù)細(xì)胞膜,減少LiAc對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)損傷的作用;同時(shí)PEG可促使質(zhì)粒更緊密貼附酵母細(xì)胞壁。LiAc可使酵母細(xì)胞產(chǎn)生一種短暫的感受性狀態(tài),此時(shí)酵母能夠攝取外源性DNA。
PEG/LiAc配套試劑是青旗生物生產(chǎn)的酵母感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化所必需的配套試劑,每個(gè)轉(zhuǎn)化反應(yīng)需要500 µl PEG/LiAc。
● 操作方法
1. Carrier DNA 在每次使用前要通過(guò)加熱處理使其變性為單鏈狀態(tài),步驟如下:Carrier DNA 放95℃水浴或金屬浴3 min,快速插入冰中,靜置3 min,再次放95℃水浴或金屬浴3 min,快速插入冰中,靜置3 min以上。
2. 取100 µl冰上融化的酵母感受態(tài)細(xì)胞,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg,Carrier DNA 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打幾次混勻,30℃水浴30 min (15 min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
3. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
4. 5000 rpm離心 40 s棄上清,ddH2O 400 µl 重懸,離心 30s棄上清。
5. ddH2O 50 µl重懸,涂板,29℃培養(yǎng)48-96 h。
● 注意事項(xiàng)
1. PEG長(zhǎng)時(shí)間靜置易沉淀,在每次使用前務(wù)必?fù)u晃,使試劑中各組分分布均勻。
2. PEG/LiAC 可在4℃長(zhǎng)時(shí)間保存。