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          網(wǎng)狀纖維染色銀染

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            研謹(jǐn)生物依托自身成熟高效的技術(shù)服務(wù)平臺、專業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì),可以按您的課題資料提供科學(xué)完善的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案、客觀真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果、完整詳實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單。如果您受時(shí)間、 試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎.您與我們聯(lián)系。“方便、 準(zhǔn)確、快捷是我們的宗旨,我們將用-流的服務(wù)為您解決實(shí)驗(yàn)中的問題!希望我們能成為您值得信賴的科研合作伙伴。
           
            為了更好、更高效的服務(wù)廣大及科研工作者,2018年我們成立了杭州研謹(jǐn)生物子公司。
           
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          wb代做,蛋白雙向(2-D)電泳,半定量RT-PCR,PKC活性檢測,明膠酶譜MMP,免疫共沉淀,流式多因子檢測,CCK8代做

          應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

          網(wǎng)狀纖維染色銀染實(shí)驗(yàn)服務(wù)

           

          實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡介:網(wǎng)狀纖維(reticular fiber)網(wǎng)狀纖維在疏松結(jié)締組織中含量較少,纖維較細(xì),有分支,彼此交織成網(wǎng)狀。用浸銀法可將纖維染成黑色,故又稱嗜銀纖維(argyrophilic fiber)。電鏡觀察,網(wǎng)狀纖維具有等間距的橫紋結(jié)構(gòu),其化學(xué)成分也是膠原蛋白,和膠原纖維相似。網(wǎng)狀纖維的嗜銀性是由于包在原纖維上的糖蛋白所致。

          實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:氨銀液被組織吸咐與組織中的蛋白結(jié)合,經(jīng)甲醛還原成黑色的金屬銀沉積于組織內(nèi)及表面。用氯化金調(diào)色后,再用硫代硫酸鈉液洗去未還原的銀鹽,從而將組織內(nèi)的網(wǎng)狀纖維清晰地顯示出來。

           

          實(shí)驗(yàn)操作流程:

          1、切片脫蠟至水,蒸餾水洗,

          2、用0.5%高 錳酸鉀氧化5min,

          3、自來水洗,繼用蒸餾水洗,

          4、用2%草酸漂白切片2min,

          5、自來水洗,蒸餾水洗,

          6、2%硫酸鐵鈹媒染5min,

          7、水洗,蒸餾水洗,

          8、滴入氨性銀溶液浸染3 -5min,

          9、蒸餾水洗數(shù)次,

          10、 10%甲醛液還原5-10min,

          11、水洗2min,

          12、用核固紅染色10-15min,

          13、水洗10min, 各級酒精脫水,

          14、 常規(guī)透明,中性樹膠封固。

          結(jié)果:網(wǎng)狀纖維黑色,核紅色,膠原纖維黃棕色。

           

          實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

          客戶提供:

          1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或80度保存,組織不少于100mg;

          2、培養(yǎng)細(xì)胞:通過細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2x106個(gè)細(xì)胞于EP管,加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復(fù)凍融) ;

          3、血液細(xì)胞標(biāo)本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入05ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,保存(-80°C可長期保存,避免反復(fù)凍融) ;

          4、血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20天, -80°C可長期保存,避免反復(fù)凍融) ;

          5、石蠟切片,冰凍切片以及細(xì)胞爬片,涂片等。

          6、樣本運(yùn)輸:可選擇以下任何一種方式寄送標(biāo)本

          組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后,加冰袋寄送;

          細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;

          血清或上清液直接加冰袋寄送(視快遞時(shí)效一般控制在2-3天內(nèi)),

           

          交付標(biāo)準(zhǔn):

          1、圖片;

          2、完整項(xiàng)目報(bào)告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果)。

          其他:

          1、所使用的玻璃儀器,須用清潔液處理。

          2、配制氨銀溶液時(shí),氨水加入的量不能過多或不足,過多感應(yīng)下降,會使液體過堿,滴染時(shí),切片容易脫落,過少則感應(yīng)上升,浸染效果不佳,不好掌握。

          3、配制氨銀液時(shí),有可能用玻璃蒸餾水。

          4、使用的化學(xué)試劑應(yīng)盡量用分析純以上。

          5、切片氧化漂白應(yīng)*,不能使殘存的福爾馬林留于片上,否則將導(dǎo)致過早還原而使浸染不均勻。

          6、如果有某種原因而導(dǎo)致切片脫落時(shí),應(yīng)使用涂膠的載片,以增加附貼性。

          7、如有可能,氨銀溶液以新配為佳,但也可保存于4°C冰箱中達(dá)一 個(gè)月左右,這種液體易揮發(fā),用后即須蓋緊,當(dāng)沉淀物出現(xiàn)時(shí),該溶液應(yīng)拋棄。

          8、應(yīng)秀氯化金調(diào)色時(shí),可將膠原纖維著染的黃棕色去除掉。




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