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          AE97768Ra 大鼠神經(jīng)肽A(NKA) ELISA Kit

          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 公司名稱 上海鹿森生物工程有限公司
          • 品牌 AMEKO
          • 型號(hào) AE97768Ra
          • 產(chǎn)地
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 更新時(shí)間 2023/11/1 17:07:50
          • 訪問次數(shù) 665
          產(chǎn)品標(biāo)簽

          大鼠神經(jīng)肽A

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          鹿森生物成是一家專業(yè)經(jīng)營生物、血清、儀器、試劑、耗材的公司,在廣大客戶的支持及公司全體員工不懈的努力下,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò),成為了國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一。自成立以來,聯(lián)碩生物一直秉承客戶至上、服務(wù)至誠;誠信為本的理念,致力于做靠譜放心的專業(yè)服務(wù)商,助力您的科研成就!

          主營品牌:Sigma、Amresco、AMEKO、LANSO、GIBCO、santa、hyclone、ABcam、Axygen、Corning、Merck、promega、GE、nunc等




          ELISA試劑盒、血清、培養(yǎng)基、胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材、生化試劑、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)

          大鼠神經(jīng)肽A(NKA) ELISA Kit

          大鼠神經(jīng)肽A(NKA) ELISA Kit

          有效期:6個(gè)月

          保存條件:2-8℃

          實(shí)驗(yàn)原理

          試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠神經(jīng)肽A(NKA) 捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠神經(jīng)肽A(NKA) 呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。


          樣本處理及要求

          1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

          2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

          3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

          注:標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。


          需要而未提供的試劑和器材

          1. 酶標(biāo)儀(450nm)

          2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

          3. 37℃恒溫箱

          4. 蒸餾水或去離子水


          試劑準(zhǔn)備

          試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

          20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。


          操作步驟

          1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

          2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

          3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

          4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

          5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

          6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

          7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。


          注意事項(xiàng)

          1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

          2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

          3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

          4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

          5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

          6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

          7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

          8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

          9. 不能使用過期產(chǎn)品。

          10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。


          洗板方法

          手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

          自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。


          實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

          以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。










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