細胞名稱：WERI-Rb-1人視網(wǎng)膜母細胞ATCC

細胞代次：P4

細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：

取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。

2、細胞傳代：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，zui后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）待細胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；

4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

4、細胞復蘇：

1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；

2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

原代細胞與細胞系有什么區(qū)別？細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的*性。細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經(jīng)過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上，連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。

1、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍，通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。

2、接收到的凍存細胞該如何處理？收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。

3、有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)？推薦有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室，我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。

售后服務告知書

1）細胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？

1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；

2. 細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；

3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；

4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

5. 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發(fā)；

6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。

二）細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？

1. 客戶造成細胞污染，不重發(fā)；

2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

4. 細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

6. 細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

7. 視具體情況而定。

YS1159P小鼠胚肺成纖維原代細胞

YS1160P小鼠前列腺成纖維原代細胞

YS1161P小鼠乳腺成纖維原代細胞

YS1162P小鼠視乳頭星形膠質(zhì)原代細胞

YS1163P小鼠微血管周原代細胞

YS1164P小鼠胸腺淋巴原代細胞

YS1165P小鼠牙齦上皮原代細胞

YS1166P小鼠牙周膜成纖維原代細胞

YS1167P小鼠真皮微血管內(nèi)皮原代細胞

YS1168P小鼠脂肪干原代細胞

YS1169P小鼠椎間盤纖維環(huán)原代細胞

YS1170P小鼠卵泡膜原代細胞

YS1171P小鼠骨骼肌衛(wèi)星原代細胞

YS1172P小鼠多巴胺神經(jīng)元原代細胞

YS1173P小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細胞

YS1174P小鼠腎小球上皮原代細胞

YS1175P小鼠全骨髓原代細胞

YS1176P小鼠脊髓星形膠質(zhì)原代細胞

YS1177P小鼠棕色脂肪原代細胞

YS1178P豬主動脈內(nèi)皮原代細胞

YS1179P豬骨髓間充質(zhì)干原代細胞

YS1180P大鼠肺微血管內(nèi)皮原代細胞

YS1181P大鼠肺血管平滑肌原代細胞

YS1182P大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細胞

YS1183P大鼠氣管上皮原代細胞

YS1184P大鼠氣管平滑肌原代細胞

YS1185P大鼠肺成纖維原代細胞

YS1186P大鼠支氣管上皮原代細胞

YS1187P大鼠支氣管成纖維原代細胞

YS1188P大鼠肺大動脈平滑肌原代細胞

YS1189P大鼠肺大動脈內(nèi)皮原代細胞

YS1190P大鼠肺動脈成纖維原代細胞

YS1191P大鼠肺大靜脈內(nèi)皮原代細胞

YS1192P大鼠胰腺星狀原代細胞

YS1193P大鼠頜下腺上皮原代細胞

YS1194P大鼠乳腺上皮原代細胞

YS1195P大鼠骨髓基質(zhì)原代細胞

YS1196P大鼠食管上皮原代細胞

YS1197P大鼠食管平滑肌原代細胞

YS1198P大鼠腸平滑肌原代細胞

YS1199P大鼠腸黏膜上皮原代細胞

YS1200P大鼠肝實質(zhì)原代細胞

YS1201P大鼠小腸隱窩上皮原代細胞

YS1202P大鼠肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

YS1203P大鼠胃黏膜上皮原代細胞

YS1204P大鼠肝竇內(nèi)皮原代細胞

YS1205P大鼠肝星狀原代細胞

YS1206P大鼠直腸平滑肌原代細胞

YS1207P大鼠小腸平滑肌原代細胞

YS1208P大鼠結(jié)腸平滑肌原代細胞

更多細胞歡迎咨詢我們：WERI-Rb-1人視網(wǎng)膜母細胞ATCC