DAPI染色液
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌 貝博生物
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/23 18:55:06
- 訪問次數(shù) 117
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保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
1.長期不用可以-20℃保存。
2.染色液避免反復(fù)凍融。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
2.染色液避免反復(fù)凍融。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
有效期
六個月
檢測方法
流式細胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦
適用樣本
動物細胞
產(chǎn)品應(yīng)用
流式細胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦
儀器準(zhǔn)備
1.熒光顯微鏡/激光共聚焦
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液 2.HBSS
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。
2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
3.染色后立即進行分析。
4.染色時間根據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。
5.本染色液可用于培養(yǎng)細胞、細胞涂片、石蠟切片、冰凍切片的檢測。石蠟切片用常規(guī)方法脫蠟、分化、冰凍切片用冰丙酮固定后檢測。
6.根據(jù)樣本情況和下游的檢測儀器選擇合適的染色方法，只要在染色時染色工作液能充分覆蓋細胞樣本即可。
7.活細胞原位染色可能需要較長時間，可將染液加入培養(yǎng)基后避光孵育1-4小時，或更長時間。
8.以下以培養(yǎng)細胞的涂片的熒光顯微鏡檢測為例，細胞染色不需要固定，也可以固定后染色，其他方法請參閱相關(guān)資料。
2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
3.染色后立即進行分析。
4.染色時間根據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。
5.本染色液可用于培養(yǎng)細胞、細胞涂片、石蠟切片、冰凍切片的檢測。石蠟切片用常規(guī)方法脫蠟、分化、冰凍切片用冰丙酮固定后檢測。
6.根據(jù)樣本情況和下游的檢測儀器選擇合適的染色方法，只要在染色時染色工作液能充分覆蓋細胞樣本即可。
7.活細胞原位染色可能需要較長時間，可將染液加入培養(yǎng)基后避光孵育1-4小時，或更長時間。
8.以下以培養(yǎng)細胞的涂片的熒光顯微鏡檢測為例，細胞染色不需要固定，也可以固定后染色，其他方法請參閱相關(guān)資料。
使用方法
1. 染色工作液的配制：
根據(jù)樣品數(shù)用PBS將DAPI染色液10-100倍稀釋，配制成染色工作液。
2. 細胞涂片的制備：
貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導(dǎo)細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培養(yǎng)后收集細胞制作涂片檢測。
對于懸浮細胞，用藥物誘導(dǎo)細胞凋亡后，500-1000g離心5分鐘收集細胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；
3. 用PBS洗滌涂片兩次。
4. 加適量染色工作液于涂片上，室溫避光染色5-20分鐘。
5. 用熒光顯微鏡檢測結(jié)果。染料-DNA復(fù)合物的激發(fā)波長為360nm，發(fā)射波長為454nm。
結(jié)果分析 ：
置于熒光顯微鏡下用360nm激發(fā)光觀察結(jié)果：DAPI染色呈藍白色熒光。
早期凋亡細胞呈現(xiàn)核濃縮，染色加深，或核染色質(zhì)呈新月形聚集于核膜一邊；晚期凋亡細胞表現(xiàn)為核碎裂成大小不等的圓形小體，并被細胞膜所包繞，即凋亡小體。
根據(jù)樣品數(shù)用PBS將DAPI染色液10-100倍稀釋，配制成染色工作液。
2. 細胞涂片的制備：
貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導(dǎo)細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培養(yǎng)后收集細胞制作涂片檢測。
對于懸浮細胞，用藥物誘導(dǎo)細胞凋亡后，500-1000g離心5分鐘收集細胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；
3. 用PBS洗滌涂片兩次。
4. 加適量染色工作液于涂片上，室溫避光染色5-20分鐘。
5. 用熒光顯微鏡檢測結(jié)果。染料-DNA復(fù)合物的激發(fā)波長為360nm，發(fā)射波長為454nm。
結(jié)果分析 ：
置于熒光顯微鏡下用360nm激發(fā)光觀察結(jié)果：DAPI染色呈藍白色熒光。
早期凋亡細胞呈現(xiàn)核濃縮，染色加深，或核染色質(zhì)呈新月形聚集于核膜一邊；晚期凋亡細胞表現(xiàn)為核碎裂成大小不等的圓形小體，并被細胞膜所包繞，即凋亡小體。
參考文獻
1.Xiaojun Zhou, et al.
BMP-2 Derived Peptide and Dexamethasone Incorporated Mesoporous Silica Nanoparticles for Enhanced Osteogenic Differentiation of Bone Mesenchymal Stem Cells
ACS Applied Materials & Interfaces 2015 （IF=8.097）
2.Siqin Huang, et al.
Protective Effect of Electroacupuncture on Neural Myelin Sheaths is Mediated via Promotion of Oligodendrocyte Proliferation and Inhibition of Oligodendrocyte Death After Compressed Spinal Cord Injury
Molecular Neurobiology 2015 （IF=5.397）
3.Wei Feng, et al.
Polyelectrolyte multilayer functionalized mesoporous silica nanoparticles for pH-responsive drug delivery: layer thickness-dependent release profiles and biocompatibility
Journal of Materials Chemistry 2013 （IF=6.101）
BMP-2 Derived Peptide and Dexamethasone Incorporated Mesoporous Silica Nanoparticles for Enhanced Osteogenic Differentiation of Bone Mesenchymal Stem Cells
ACS Applied Materials & Interfaces 2015 （IF=8.097）
2.Siqin Huang, et al.
Protective Effect of Electroacupuncture on Neural Myelin Sheaths is Mediated via Promotion of Oligodendrocyte Proliferation and Inhibition of Oligodendrocyte Death After Compressed Spinal Cord Injury
Molecular Neurobiology 2015 （IF=5.397）
3.Wei Feng, et al.
Polyelectrolyte multilayer functionalized mesoporous silica nanoparticles for pH-responsive drug delivery: layer thickness-dependent release profiles and biocompatibility
Journal of Materials Chemistry 2013 （IF=6.101）
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