植物總糖和還原糖檢測(cè)試劑盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/25 12:31:52
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保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項(xiàng)
開(kāi)蓋后組份按要求條件保存。
有效期
一年
檢測(cè)方法
分光光度計(jì)
適用樣本
植物
產(chǎn)品應(yīng)用
分光光度計(jì)
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.水浴鍋或恒溫箱
3.分光光度計(jì)
2.水浴鍋或恒溫箱
3.分光光度計(jì)
試劑準(zhǔn)備
1.蒸餾水
2.氫氧化鈉溶液
2.氫氧化鈉溶液
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
2.吸頭
使用注意事項(xiàng)
1. 試劑盒里的低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降；
2. 待測(cè)樣品如不能及時(shí)測(cè)定，請(qǐng)置于2-8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定；
3. 如果樣品還原糖濃度過(guò)高，用蒸餾水稀釋后測(cè)定，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；
4. 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用，x0.9 是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時(shí)所消耗的水量。
2. 待測(cè)樣品如不能及時(shí)測(cè)定，請(qǐng)置于2-8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定；
3. 如果樣品還原糖濃度過(guò)高，用蒸餾水稀釋后測(cè)定，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；
4. 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用，x0.9 是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時(shí)所消耗的水量。
使用方法
1. 還原糖的提取：
①稱(chēng)取植物樣品0.5－3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2－3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②50℃水浴30min，并不時(shí)攪拌，以便還原糖浸出。
③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管，4000g離心5min。
④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。
⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測(cè)液。
2. 總糖的水解和提?。?br>①稱(chēng)取植物樣品0.5－3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2－3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌。
③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解是否，如已經(jīng)水解，則不顯示藍(lán)色。
④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min或過(guò)濾。
⑤取上清或?yàn)V液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋1000倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液，測(cè)定其還原糖的含量。
3. 制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：
取干凈離心管或試管，按下表進(jìn)行操作，以0號(hào)調(diào)零，檢測(cè)540nm處吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4、還原糖測(cè)定：
取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1ml，分別加入DNS檢測(cè)液2ml，其余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作，540nm處測(cè)定各管的吸光度。
5. 計(jì)算：
還原糖的百分含量：還原糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100
總糖的百分含量：總糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100x 10 x 0.9
式中：C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的糖量（mg）
VT=提取液的體積（ml）
m=植物樣品的質(zhì)量（mg）
Vs=測(cè)定時(shí)用的樣品體積（ml）
①稱(chēng)取植物樣品0.5－3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2－3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②50℃水浴30min，并不時(shí)攪拌，以便還原糖浸出。
③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管，4000g離心5min。
④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。
⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測(cè)液。
2. 總糖的水解和提?。?br>①稱(chēng)取植物樣品0.5－3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2－3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌。
③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解是否，如已經(jīng)水解，則不顯示藍(lán)色。
④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min或過(guò)濾。
⑤取上清或?yàn)V液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋1000倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液，測(cè)定其還原糖的含量。
3. 制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：
取干凈離心管或試管，按下表進(jìn)行操作，以0號(hào)調(diào)零，檢測(cè)540nm處吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4、還原糖測(cè)定：
取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1ml，分別加入DNS檢測(cè)液2ml，其余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作，540nm處測(cè)定各管的吸光度。
5. 計(jì)算：
還原糖的百分含量：還原糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100
總糖的百分含量：總糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100x 10 x 0.9
式中：C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的糖量（mg）
VT=提取液的體積（ml）
m=植物樣品的質(zhì)量（mg）
Vs=測(cè)定時(shí)用的樣品體積（ml）
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