1.2 RNAi載體構(gòu)建服務(wù)
- 公司名稱 北京華夏遠洋科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 中國
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2018/3/18 23:38:07
- 訪問次數(shù) 1312
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1.2 RNAi載體構(gòu)建服務(wù)
諾百優(yōu)勢
質(zhì)量保證：針對一個基因的不同位置設(shè)計4條miRNA序列，在轉(zhuǎn)染效率>80%的前提下，我們保證至少2個克隆在mRNA水平
達到70%以上的Knockdown效率
多種平臺載體可供選擇：shRNA載體，miRNA干擾載體（第二代干擾載體），miR-shRNA載體（第三代干擾載體）
利用綠色熒光蛋白（GFP）和感興趣的RNAi序列協(xié)同表達，方便追蹤
可將多個RNAi序列串聯(lián)到同一表達載體中并同時表達，進行多個靶基因的同時干擾
原理
RNA干擾（RNAi）是有效抑制基因表達以及研究各種細胞類型中蛋白質(zhì)功能的*方法。相比傳統(tǒng)的短/小干擾RNA（siRNA），
使用載體進行RNAi實驗*地擴展了實驗的可能性。
采用載體技術(shù)能夠：
實現(xiàn)瞬時或穩(wěn)定的靶標抑制
在任何類型的細胞（甚至是難轉(zhuǎn)染的細胞、原代細胞和非分裂細胞）中執(zhí)行 RNAi
通過誘導(dǎo)型RNAi表達來調(diào)控基因抑制
選擇穩(wěn)定表達RNAi序列的純細胞群
通過組織特異性啟動子控制體內(nèi)基因表達
我們的RNAi載體構(gòu)建，有以下選擇：
1） shRNA干擾載體構(gòu)建：短發(fā)卡RNA（shRNA）是可以克隆到表達載體并表達短的干擾RNA（siRNA，19 - 21個核苷酸的
RNA雙鏈）的DNA分子。我們可根據(jù)靶標設(shè)計短發(fā)卡RNA （shRNA）序列并將其克隆入shRNA載體上。
2） miRNA（microRNA）干擾載體構(gòu)建：屬于第二代RNA干擾載體平臺，擁有更高干擾效率和RNA干擾片段設(shè)計成功率。
miR RNAi表達載體采用Pol II啟動子表達人工設(shè)計的miRNA，后者從長的轉(zhuǎn)錄本被加工，進而導(dǎo)致特異性的mRNA的降解。
3） shRNAmir是用19nt的siRNA序列替代miRNA中的作用序列，保持miRNA的環(huán)和雙臂結(jié)構(gòu)。基于miRNA mir-30或miRNA
mir-155雙臂結(jié)構(gòu)的shRNAmir質(zhì)粒載體RNAi效果更好：shRNAmir是目前效果的RNAi產(chǎn)品形式。
服務(wù)流程
1） 客戶提供：基因的Accession Number
2） 針對特定基因，設(shè)計RNAi序列；合成該序列并退火生成雙鏈DNA
3） 將DNA與RNAi載體相連，連接物轉(zhuǎn)化大腸桿菌
4） 測定全長序列以鑒定序列的正確性；制備甘油菌
5） 提供數(shù)據(jù)分析和報告給客戶
6） 我們提供：構(gòu)建好的RNAi表達載體和相應(yīng)的甘油菌
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