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1.
農(nóng)殘試劑配置
緩沖溶液：
取一包緩沖劑，
加入
500ml
蒸餾水，
溶解攪拌均勻，
密閉、
避光、
陰涼處保存。
顯色劑：取顯色劑一瓶，加入
15ml
緩沖溶液溶解，
4
℃冰箱中保存。
底物：取底物一瓶，加入
15ml
蒸餾水溶解，
4
℃冰箱中保存。
乙酰膽堿酯酶：
取乙酰膽堿酯酶一瓶，
用
3ml
緩沖溶液溶解，
4
℃冰箱中保
存。
2.
樣品處理
選取有代表性的蔬菜樣品，
擦掉樣品表面泥土，
剪成
1cm
見方碎片，
取樣品
1g
，放入燒杯或提取瓶中，加入
5ml
緩沖溶液，振蕩
1min
～
2min
，倒出提取液，
靜置
3min
～
5min
，待用。
注意：
樣品不可用水沖洗，
應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。
為了保證取樣具有代
表性，
葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本，
果菜從不同個體的表皮處取
樣。
3.
對照溶液測試
在提取瓶中加入
2.5ml
緩沖溶液，再加入
100ul
酶液、
100ul
顯色劑，搖勻
后于
37℃放置
15
分鐘
(
每批樣品的控制時間必須一致
)
。
15
分鐘后再加入
100
μ
L
底物搖勻
,
此時檢液開始顯色反應(yīng)
,
應(yīng)立即倒入
1cm
比色皿，放入儀器比色池中，
將儀器調(diào)到測量界面
,
按操作指示面板按鍵區(qū)的
“對照”
按鈕，
儀器開始做對照。
3
分鐘后儀器自動對照完成，對照完成后將對照樣取出，保持儀器界面不變。
注意：對照測試必須在*通道進(jìn)行，對照測試△
A
應(yīng)＞
0.3
，若對照測試
的結(jié)果小于以上數(shù)值時，儀器會自動提示“對照錯誤”
，須重新做對照，以保證
測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
(
對照測試△
A<0.3
的原因：一是酶的活性不夠，二是反應(yīng)
溫度太低。
)
4.
樣品溶液測試
另取干凈的提取瓶，放入
2.5ml
樣品提取液，加入
100ul
酶液、
100ul
顯色
劑，搖勻后于
37℃放置
15
分鐘
(
放置的時間與對照液放置的時間必須一致
)
。
15
分鐘后再加入
100
μ
L
底物搖勻
,
此時檢液開始顯色反應(yīng)
,
應(yīng)立即倒入
1cm
比色皿，
放入儀器比色池中，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測量”按鈕開始測量，
3
分鐘后
儀器測量完成，顯示測量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當(dāng)蔬菜
樣品提取液對酶的抑制率≥
50%
時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類
農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗
2
次以上。
對陽性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
5.
說明
蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有
影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬
菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減
少色素的干擾。
