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高速逆流色譜儀的應用概念
閱讀：732發(fā)布時間：2024-2-22
高速逆流色譜儀是一種液相色譜技術，利用液液兩相的逆流分配，在不需要使用固態(tài)固定相的情況下，通過離心力將固定相保留在一系列連接的腔體中，實現(xiàn)復雜化學物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相，利用離心力產(chǎn)生的恒定力將兩相互相混合，保留其中一相，并通過恒流泵連續(xù)輸入另一相，樣品溶質(zhì)在兩相之間反復分配，按分配系數(shù)的次序逐漸洗脫出來。
高速逆流色譜法是建立在單向性流體動力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉管的流體動力平衡時偶然發(fā)現(xiàn)的。當螺旋管在慢速轉動時，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動相從一端向另一端洗脫時，另一相在螺旋管里的保留值大約50%，但這一保留量會隨著移動相流速的增大而減小，使分離效率降低。但使螺旋管的轉速加快時，兩相的分布發(fā)生變化。當轉速達到臨界范圍時，兩相就會沿螺旋管長度分開，其中一相全部占據(jù)首端的一段，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段，稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉動速下，如果從尾端送入首端相，它將穿過尾端相而移向首端，同樣，如果從首端相送入尾相，它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。分離時，在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相)，然后從合適的一端泵入移動相，讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配。儀器轉速越快，固定相保留越多，分離效果越好，且大地提高了分離速度，故稱高速逆流色譜。
廣泛的應用范圍和適應性：適用于分離各種極性范圍的樣品，尤其在分離天然化合物方面表現(xiàn)比較好。由于不需要固體載體，消除了氣液色譜中的吸附現(xiàn)象，適用于分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì)。
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