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當前位置:研域(上海)化學試劑有限公司>>技術文章>>研域教您一抗/二抗該怎么選?
我們在生活中經(jīng)常會面臨做選擇這樣的一個難題,其實做選擇本身并不是多么困難的事情,關鍵在于您是否了解自己內(nèi)心真正需要的是什么。就好比我們的實驗者在選擇產(chǎn)品的品牌、質量、規(guī)格等,根據(jù)這些信息再去做相關的判斷。比如zui簡單的一個例子,不少的伙伴都對一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱,那如何選擇呢,研域教您!
擇一抗宿主物種
通常,當使用偶聯(lián)二抗檢測未偶聯(lián)一抗時,產(chǎn)生抗體的宿主動物物種就顯得非常重要。對于免疫組織化學,產(chǎn)生一抗的物種應盡可能與樣品物種不同。這是為了避免抗免疫球蛋白的二抗與樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白間發(fā)生潛在交叉反應性。更為恰當?shù)倪x擇是來源于兔的一抗,然后是偶聯(lián)于檢測分子的抗兔IgG二抗。如果可提供偶聯(lián)一抗,則可避免此問題。對于使用不包含內(nèi)源性免疫球蛋白的樣品的其它技術,宿主物種的選擇則不那么重要。
組織裂解物和組織培養(yǎng)物上清液包含免疫球蛋白。對還原、變性樣品進行蛋白質印跡時,IgG會以50和25kDa的條帶顯現(xiàn),這兩個條帶分別對應于IgG分子的重鏈和輕鏈。
選擇二抗
二抗應來源于與所使用一抗相同的物種。例如,如果您的一抗為小鼠單克隆抗體,那么就需選抗小鼠二抗。我們推薦您查看二抗的數(shù)據(jù)表以確保它已在您將要使用的應用中進行了測試。
抗體數(shù)據(jù)表列出了已經(jīng)過測試并證明行之有效的應用。如果未列出某項應用,并不表示該抗體不適于該應用。它只是表示尚未經(jīng)過測試并且抗體表現(xiàn)如何未知。當應用已經(jīng)過測試并證明無效時,數(shù)據(jù)表上會加以說明。
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