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當前位置:研域(上海)化學試劑有限公司>>技術文章>>研域教您一抗/二抗該怎么選?
我們在生活中經常會面臨做選擇這樣的一個難題,其實做選擇本身并不是多么困難的事情,關鍵在于您是否了解自己內心真正需要的是什么。就好比我們的實驗者在選擇產品的品牌、質量、規(guī)格等,根據這些信息再去做相關的判斷。比如zui簡單的一個例子,不少的伙伴都對一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱,那如何選擇呢,研域教您!
擇一抗宿主物種
通常,當使用偶聯二抗檢測未偶聯一抗時,產生抗體的宿主動物物種就顯得非常重要。對于免疫組織化學,產生一抗的物種應盡可能與樣品物種不同。這是為了避免抗免疫球蛋白的二抗與樣品中的內源性免疫球蛋白間發(fā)生潛在交叉反應性。更為恰當的選擇是來源于兔的一抗,然后是偶聯于檢測分子的抗兔IgG二抗。如果可提供偶聯一抗,則可避免此問題。對于使用不包含內源性免疫球蛋白的樣品的其它技術,宿主物種的選擇則不那么重要。
組織裂解物和組織培養(yǎng)物上清液包含免疫球蛋白。對還原、變性樣品進行蛋白質印跡時,IgG會以50和25kDa的條帶顯現,這兩個條帶分別對應于IgG分子的重鏈和輕鏈。
選擇二抗
二抗應來源于與所使用一抗相同的物種。例如,如果您的一抗為小鼠單克隆抗體,那么就需選抗小鼠二抗。我們推薦您查看二抗的數據表以確保它已在您將要使用的應用中進行了測試。
抗體數據表列出了已經過測試并證明行之有效的應用。如果未列出某項應用,并不表示該抗體不適于該應用。它只是表示尚未經過測試并且抗體表現如何未知。當應用已經過測試并證明無效時,數據表上會加以說明。
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