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怎樣判斷ELISA試劑盒試劑是否合格
一:查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問題的才干,對(duì)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
二:運(yùn)用校對(duì)過的微量移液器,排除天然差錯(cuò)。移液器精確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
三:仔細(xì)閱讀說明書嚴(yán)厲按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的當(dāng)?shù)兀貜?fù)實(shí)驗(yàn)斷定建立后才干改善。
四:洗刷*:洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗刷液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能呈現(xiàn)假陽性。
五:嚴(yán)控反響時(shí)刻:反響時(shí)刻過長(zhǎng),酶失活;反響時(shí)刻過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松懈不結(jié)實(shí),簡(jiǎn)單洗掉,都可能形成假陰性。
六:留意ELISA試劑盒保存期,過保存期的試劑不能運(yùn)用。
七:評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性:試劑的安穩(wěn)與否,對(duì)精確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品重復(fù)對(duì)比實(shí)驗(yàn)。顯色時(shí)刻過短,參加停止液反響停止后,底物結(jié)合物的量過少,易ELISA試劑盒呈現(xiàn)假陰性。超越顯色要求時(shí)刻后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑自身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不行報(bào)陽性,這可能是本底顯色的成果。
八:加樣要精確、快速
假如加樣不精確,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與參加顯色劑和停止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),假如加樣遲緩,便呈現(xiàn)差錯(cuò),而且ELISA試劑盒試劑長(zhǎng)時(shí)刻暴露在外,特別室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短乃至失效。
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