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ELISA試劑盒的應用:
1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
ELISA試劑盒的操作步驟:
一、雙抗體夾心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
二、間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
6.’zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
研域(上海)化學試劑主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,雞、鴨、猴、兔的ELISA試劑盒。
進口培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,大腸桿菌O157培養(yǎng)基,細菌總數(shù)培養(yǎng)基,弧菌檢驗培養(yǎng)基,李斯特氏菌檢驗培養(yǎng)基。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清。
生物試劑:Amresco,Sigma,Spectrum進口試劑。
標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品,進口標準試劑。
我司秉承專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務的企業(yè)文化積極參與生物領域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務,力求為我國科研事業(yè)添磚加瓦。研域(上海)化學試劑有限公司開展了雙11*活動,活動期間所有產(chǎn)品五折優(yōu)惠,另外還有驚喜大獎等你來拿,歡迎廣大客戶。
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