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        1. 北京西美杰科技有限公司

          主營產(chǎn)品: 生物學(xué)檢測試劑盒,化學(xué)試劑,蛋白質(zhì)氧化損傷,抗原抗體

          15

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          公司信息

          聯(lián)人:
          西美杰
          話:
          400-050-4006
          機:
          18210960361
          售后電話:
          010-88597838
          址:
          北京市海淀區(qū)金源時代商務(wù)中心B座10F
          編:
          100097
          網(wǎng)址:
          www.xmjsci.com
          鋪:
          http://m.facexiu.com/st118010/
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          西美杰*病毒包裝方案:五大流程,一個對策!

          2018-1-24  閱讀(1716)

          西美杰*病毒包裝方案:五大流程,一個對策!

               不論是細胞治療還是基因治療都離不開病毒載體。目前使用zui多的病毒載體類型包括:腺相關(guān)病毒(AAV)、慢病毒(Lv)、逆轉(zhuǎn)錄病毒(Rv)和腺病毒(Adv)等,這些常用病毒載體特性如下圖所示:

          特征

          慢病毒
          Lentivirus

          逆轉(zhuǎn)錄病毒
          Retrovirus

          腺相關(guān)病毒
          AAV

          腺病毒
          ADV

          基因表達

          穩(wěn)轉(zhuǎn)/瞬轉(zhuǎn)

          穩(wěn)轉(zhuǎn)

          瞬轉(zhuǎn)

          瞬轉(zhuǎn)

          是否能感染可分裂的細胞

          是否能感染不分裂的細胞

          是否能整合到靶細胞基因組

          靶細胞的免疫反應(yīng)

          較低

          非常低

          病毒滴度

          +++

          ++

          +++

          ++++

          轉(zhuǎn)染效率

          +++

          ++

          +++

          ++++



          因此在選擇病毒載體時,除了要考慮載體自身特征之外,如何包裝并獲取高滴度高活性的病毒載體對后續(xù)實驗至關(guān)重要,針對病毒載體制備5大環(huán)節(jié),小美為您推薦如下解決方案↓



          1. 病毒載體包裝質(zhì)粒系統(tǒng)
          西美杰代理的美國Cell Biolabs公司推出的病毒包裝系統(tǒng)可滿足多種重組病毒包裝需求,包括四大類型病毒包裝質(zhì)粒AAV Helper Free System、ViraSafe™ Lentivirus Expression Complete Systems、Platinum Retroviral Expression Systems以及RAPAd® Adenoviral Expression Systems等。更多病毒包裝質(zhì)粒系統(tǒng)介紹請點這里。

           

          2. 病毒包裝試劑

          A. 病毒包裝轉(zhuǎn)染試劑
          西美杰代理的美國Mirus公司新推出的病毒包裝轉(zhuǎn)染試劑TransIT®-VirusGEN™與TransIT®-Lenti系列,專門針對AAV和Lentivirus設(shè)計,相比傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法能獲得更高的轉(zhuǎn)染效率和病毒滴度,無動物源成分且兼容多種病毒包裝系統(tǒng)及不同細胞系類型。

          品名

          貨號

          規(guī)格

          適用病毒類型

          TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent

          MIR 6703

          0.3/0.75/1.5mL

          AAV & Lentivirus

          TransIT®-Lenti Transfection Reagent

          MIR 6603

          0.3/0.75/1.5mL

          Lentivirus

           

          B. Lv/Rv包裝效率增強劑Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up
          西美杰*代理的101Bio品牌Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up用于重組慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝過程,可促進病毒基因組轉(zhuǎn)錄和RNA穩(wěn)定,使轉(zhuǎn)染效率提高10倍左右。

          品名

          貨號

          規(guī)格

          適用病毒類型

          Lentivirus 10X Titer-Up

          P906

          1 mL

          Lentivirus

          Retrovirus 10X Titer-Up

          P909

          1 mL

          Retrovirus

           

          C. AAV/Adv病毒釋放液Virus-High® AAV/ADV Release Solution
          西美杰*代理的101Bio品牌Virus-High® AAV/ADV Release Solution是一款無需反復(fù)凍融,即可從細胞中快速收獲AAV/Adv病毒以及其他非分泌型無囊膜病毒的試劑。

          品名

          貨號

          規(guī)格

          適用病毒類型

          Virus-High® AAV / Adv Release Solution

          P900

          10 mL

          AAV & Adv

           

          3. 快速病毒濃縮試劑與純化試劑盒
          西美杰*代理的美國Cali-bio和Cell Biolabs品牌專門針對病毒載體設(shè)計的重組病毒濃縮純化試劑(盒),在獲得重組病毒高回收率的同時大大簡化操作流程,無需超速離心設(shè)備,是中小規(guī)模樣本純化的方案。

          重組病毒類型

          品名

          貨號

          特點

          逆轉(zhuǎn)錄病毒
          (Retrovirus)

          Retrovirus Concentration Solution(5×)
          逆轉(zhuǎn)錄病毒濃縮試劑

          CB300904

          無需超速離心;
          1小時內(nèi)病毒濃縮10-100倍;
          濃縮后病毒適用于各種細胞;

          慢病毒
          (Lentivirus)

          Lentivirus Concentration Solution(5×)
          慢病毒濃縮試劑

          CB300905

          ViraBind™ Lentivirus Purification Kit

          VPK-104

          操作時間< 2h,無需超速離心;

          回收率>90%,純化效果與CsCl方法相當(dāng)

          腺相關(guān)病毒
          (AAV)

          ViraBind™ AAV Purification Kit
          (適用樣本量為2個10cm皿或1個15cm皿收獲的上清)

          VPK-140

          適用于純化AAV-2與AAV-DJ;
          操作時間約3h;

          ViraBind™ AAV Purification Mega Kit
          (一次處理樣本量可達10個15cm皿收獲的上清)

          VPK-141

          獲得AAV純度>95%,回收率>60%

          腺病毒
          (ADV)

          ViraBind™ Adenovirus Miniprep Kit
          (適用樣本量為1個T75瓶或1個10cm皿收獲的上清)

          VPK-099

          采用特殊濾膜和離心柱;
          操作時間約30min,無需超速離心;

          ViraBind™ Adenovirus Purification Kit
          (適用樣本量約為4個T75瓶收獲的上清)

          VPK-100

          回收率>90%,純化效果與CsCl方法相當(dāng)

           

          4. 病毒滴度檢測試劑盒
          測定重組病毒滴度是提高下游實驗可控性,重復(fù)性和準確性的前提,西美杰代理的Cell Biolabs品牌針對不同病毒載體的特性分別設(shè)計的了多種滴度測定試劑盒,并且兼容了和的測定方法。

          重組病毒類型

          品名

          貨號

          特點

          慢病毒
          (Lentivirus)

          Lentivirus Rapid Quantitation Kit

          VPK-112

          快速定量,操作過程45-60min;
          熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度,純化前或純化后樣品都可檢測;
          靈敏度:1010個病毒粒子/mL或100ul純化前上清

          Lentivirus-Associated p24 ELISA Kit

          VPK-107

          Pull-down技術(shù)分離出病毒相關(guān)P24蛋白,去除游離P24蛋白;
          ELISA方法定量有活性的重組慢病毒滴度,避免傳統(tǒng)方法檢測總P24蛋白導(dǎo)致的誤差

          Traditional p24 ELISA Kit

          VPK-108-H

          ELISA方法檢測總P24蛋白定量慢病毒滴度

          逆轉(zhuǎn)錄病毒
          (Retrovirus)

          QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit

          VPK-120

          快速定量,操作過程45-60min;
          熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度,純化前或純化后樣品都可檢測;
          靈敏度:1.5×109個病毒粒子/mL或100ul純化前上清

          腺相關(guān)病毒
          (AAV)

          QuickTiter™ AAV Quantitation Kit

          VPK-145

          快速定量,操作過程<2h;
          熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度;
          靈敏度:純化前AAV可達109 GC/mL,對于純化后AAV可達5×1010 GC/mL

          腺病毒
          (ADV)

          QuickTiter™ Adenovirus Quantitation Kit

          VPK-106

          快速定量,操作過程45-60min;
          熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度,純化前或純化后樣品都可檢測;
          靈敏度:1010個病毒粒子/mL或100ul純化前上清

          QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit

          VPK-109

          無需空斑形成實驗,避免復(fù)雜的鋪瓊脂步驟,操作更簡便;
          傳統(tǒng)方法10天才可完成的實驗,用該試劑盒僅需2.5天,有ELISA和ICC兩種方法供選擇;

          QuickTiter™ Adenovirus Titer ELISA Kit

          VPK-110

          可用于所有41個血清型的腺病毒



          5. 病毒感染增強試劑
          西美杰代理的Cell Biolabs品牌還針對不同病毒載體研發(fā)了促病毒感染試劑,能顯著提高病毒對靶細胞的感染,進而提高基因表達效率。

          品名

          貨號

          規(guī)格

          特點

          ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit

          LTV-200

          40 次

          復(fù)合型試劑能與慢病毒或逆轉(zhuǎn)率病毒形成復(fù)合物,與Polybrene®相比病毒感染效率可提高2-6倍,適用于原代細胞和干細胞

          LTV-201

          200次

          ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit

          RV-200

          40次

          RV-201

          200次

          ViraDuctin™ AAV Transduction Kit

          AAV-200

          10次

          有效提高重組AAV在多種細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)染效率,包括傳統(tǒng)方法轉(zhuǎn)導(dǎo)效率低的細胞和非分裂細胞,如原代細胞和干細胞。該試劑使用方便,僅需2h,是AAV轉(zhuǎn)染非分裂細胞的。

          AAV-201

          50次

          ViraDuctin™ Adenovirus Transduction Reagent

          AD-200

          10次

          該試劑讓重組腺病毒感染不依賴于細胞的CAR(柯薩奇病毒-腺病毒受體)水平,可顯著提高病毒感染低CAR或無CAR表達的細胞,如原代細胞或干細胞,還可提高轉(zhuǎn)入基因的表達效率

          AD-201

          50次

           

          如果您對上述方案感興趣,歡迎隨時登錄北京西美杰www.xmjsci。。com查詢相關(guān)產(chǎn)品或西美杰全國,小美期待您的垂詢。



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