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如何選擇二抗之一—根據(jù)一抗種屬及類型選擇二抗
2010-5-5 閱讀(2137)
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,同時在后繼試驗中也會有不同的檢測方案,因此在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求,其中如何根據(jù)一抗的種屬來源和類型選擇二抗尤為重要。
一抗的種屬來源:
二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體,則相應的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據(jù)一抗的物種來源選擇相應的抗該物種的二抗。西美杰能為您提供zui全的抗不同種屬的*二抗,包括抗小鼠二抗(anti-mouse)、抗兔二抗(anti-rabbit)、抗山羊二抗(anti-goat)、抗綿羊二抗(anti- sheep)、抗人二抗(anti-human)、抗豚鼠二抗(anti- guinea pig)、抗大鼠二抗(anti-rat)、抗豬二抗(anti-swine)、抗馬二抗(anti-horse)、抗牛二抗(anti- bovine)、抗雞二抗(anti- chicken)、抗鴨二抗(anti- duck)等。
另外,為減少二抗與樣本的非特異性結(jié)合,西美杰還能為您提供不同血清吸附的*二抗。如您的檢測樣本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗就需要選擇抗小鼠源的二抗,如果您對實驗的特異性要求很高,那西美杰向您推薦經(jīng)過人血清吸附過的抗小鼠源的二抗,這種二抗由于經(jīng)過人血清吸附而排除了與人源組織(如Fc受體等)可能發(fā)生非特異性反應的IgG,因此將非特異性結(jié)合降低到zui低。如HRP Labled Anti-Rabbit IgG (H+L) Antibody, Human Serum Adsorbed二抗就是經(jīng)過人血清吸附過的。而Anti-Mouse IgG (H+L), Extra Serum Adsorbed, Peroxidase-labele二抗則是經(jīng)過多種血清吸附過的二抗。
一抗的類別亞型:
除了要與一抗的種屬來源相一致,二抗還需與一抗的類別或亞類相匹配,這通常是針對單克隆抗體而言。一般來說多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應的二抗就是抗IgG抗體。而單克隆抗體則相對復雜些,由于單克隆抗體有不同的類別和亞型,因此相應的二抗也需要根據(jù)這些亞型進行選擇。
單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品說明書中都會有描述,如果您的一抗是小鼠IgM,那么相應的二抗就應當是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合,或者您也可以選擇專門針對這一亞類的二抗,例如,如果您的一抗是小鼠IgG1,那么您可以選擇抗IgG1的二抗,此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下,可以選用抗相應物種IgG。西美杰能為您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特異性只結(jié)合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha) Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。
由于在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求,因此除了需要考慮一抗的種屬及類型外,還需要根據(jù)后繼的檢測方案選擇不同標記的二抗,因此需要對二抗的標記物進行選擇。
西美杰備有全面的二抗現(xiàn)貨產(chǎn)品并能提供zui完整的二抗產(chǎn)品線。主要二抗品牌為zui大的二抗和底物生產(chǎn)廠商KPL以及前沿抗體生產(chǎn)商 ProteinTech。按照標記分,有HRP、AP、生物素等標記二抗,F(xiàn)ITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等熒光二抗;按照檢測物種分,有抗人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉鼠、狗、牛,以及多種細菌類二抗;另外,還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同類型抗體。更多產(chǎn)品請隨時西美杰,西美杰能為您提供一站式的產(chǎn)品和服務支持。