北京西美杰科技有限公司
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細(xì)胞培養(yǎng)基重要原料——氨基酸
氨基酸是一種同時(shí)含有羧基(-COOH)和氨基(-NH2)的化學(xué)分子,是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位。在Eagle(1955)、Dulbecco和Freeman(1959)等人開(kāi)創(chuàng)性地研究出了一種含有氨基酸、維生素的營(yíng)養(yǎng)液(Dulbecco’s Modification of Eagles Medium, DMEM),使得細(xì)胞可以在體外進(jìn)行單層貼壁培養(yǎng)開(kāi)始,氨基酸就被認(rèn)為是細(xì)胞體外培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分。
氨基酸化學(xué)式
氨基酸在細(xì)胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
? 氨基酸作為蛋白質(zhì)的基本組成單位,參與合成細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì),包括細(xì)胞骨架、酶、受體和信號(hào)分子等;
? 氨基酸可以用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;
? 某些氨基酸還具有*的生理作用,如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用,丙氨酸和谷氨酸參與細(xì)胞內(nèi)氨的運(yùn)輸?shù)龋?/span>
? 氨基酸還可以轉(zhuǎn)變成糖和脂肪,參與氧化途徑并為細(xì)胞代謝提供能量。
下圖展示了CHO細(xì)胞中氨基酸參與的細(xì)胞內(nèi)代謝途徑(綠色線條表示碳代謝途徑,單字母表示氨基酸)。
圖片來(lái)源:Kanehisa et al. 2014
氨基酸作為在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中*的成分之一,對(duì)細(xì)胞的狀態(tài),高密度的維持以及蛋白產(chǎn)量、質(zhì)量都發(fā)揮著重要的作用。并且細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中氨基酸會(huì)隨細(xì)胞表達(dá)的蛋白不同而發(fā)生變化和消耗,通常需要在細(xì)胞培養(yǎng)工藝的不同階段添加不同成分和比例的氨基酸進(jìn)行補(bǔ)充。
細(xì)胞能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,D型氨基酸不能被利用。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,但根據(jù)細(xì)胞自身能否合成,可將常見(jiàn)的20種氨基酸分為必需氨基酸(Essential amino acids)和非必需氨基酸(Nonessential amino acids)。其中,必需氨基酸不能由細(xì)胞自身合成,只能從培養(yǎng)基中獲取,包括組氨酸(L-Histidine)、異亮氨酸(L-Isoleucine)、亮氨酸(L-Leucine)、賴氨酸(L-Lysine)、甲硫氨酸(L-Methionine)、苯丙氨酸(L-Phenylalanine)、蘇氨酸(L-Threonine)、色氨酸(L-Tryptophan)、纈氨酸(L-Valine)、半胱氨酸(L-Cysteine)、酪氨酸(L-Tyrosine)、精氨酸(L-Arginine)及谷氨酰胺(L-Glutamine),因此在細(xì)胞培養(yǎng)基配方中,必需氨基酸的濃度通常較高。非必需氨基酸(Nonessential amino acids)包括了丙氨酸(L-Alanine)、天冬氨酸(L- Aspartic acid)、天冬酰胺(L- Asparagine)、谷氨酸(L- Glutamic acid)、脯氨酸(L- Proline)、絲氨酸(L-Serine)、甘氨酸(Glycine),這些氨基酸雖然可以由細(xì)胞自身合成,或通過(guò)轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來(lái),但在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度的非必需氨基酸能減輕細(xì)胞在合成方面的負(fù)擔(dān),提高其他營(yíng)養(yǎng)成分的利用率。除了上述20種編碼蛋白質(zhì)的氨基酸以外,在細(xì)胞培養(yǎng)基中常用到的還包括L-胱氨酸(由2個(gè)L-半胱氨酸以二硫鍵結(jié)合形成)和L-羥脯氨酸等。
細(xì)胞培養(yǎng)基重要原料——氨基酸
北京西美杰科技有限公司代理的Applichem品牌可提供高品質(zhì)非動(dòng)物源氨基酸系列產(chǎn)品,可滿足生物制藥企業(yè)大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的高標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別需求,產(chǎn)品詳情見(jiàn)下表。
中文名稱 | 英文名稱 | 級(jí)別 | CAS No. | |
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 | L-Alanyl-L-Glutamine | 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) | 39537-23-0 | |
A1688 | L-丙氨酸 | L- Alanine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 56-41-7 |
A1668 | L-天冬酰胺,一水 | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 5794-13-8 | |
A1701 | L-天冬氨酸 | L-Aspartic Acid | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 56-84-8 |
A1425 | L-半胱氨酸 | L-Cysteine | 藥典級(jí) | 52-90-4 |
A1702 | L-半胱氨酸鹽酸鹽,一水 | L-Cysteine Hydrochloride 1-hydrate | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 7048-04-6 |
A1703 | L-胱氨酸 | L-Cystine | 歐洲藥典 | 56-89-3 |
A0622 | L-胱氨酸鹽酸鹽 | L-Cystine Dihydrochloride | 化學(xué)純 | 30925-07-6 |
A1704 | L-谷氨酸 | L-Glutamic Acid | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 56-86-0 |
A1420 | L-谷氨酰胺 | L-Glutamine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 56-85-9 |
141340 | 甘氨酸 | Glycine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 56-40-6 |
A1705 | L-羥脯氨酸 | L-Hydroxyproline pure | 化學(xué)純 | 51-35-4 |
A1440 | L-異亮氨酸 | L-Isoleucine | 歐洲、美國(guó)藥典 | 73-32-5 |
A1426 | L-亮氨酸 | L-Leucine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 61-90-5 |
A1342 | L-賴氨酸 一水 | L-Lysine | 藥典級(jí) | 39665-12-8 |
A1706 | L-賴氨酸鹽酸鹽 | L-Lysine Monohydrochloride | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 657-27-2 |
A1340 | L-甲硫氨酸 | L-Methionine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 63-68-3 |
A1344 | L-苯丙氨酸 | L- Phenylalanine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 63-91-2 |
A1707 | L-脯氨酸 | L- Proline | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 147-85-3 |
A1708 | L-絲氨酸 | L-Serine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 56-45-1 |
A1419 | L-蘇氨酸 | L-Threonine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 72-19-5 |
A1645 | L-色氨酸 | L-Tryptophan | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 73-22-3 |
A1677 | L-酪氨酸 | L-Tyrosine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 60-18-4 |
A1637 | L-纈氨酸 | L-Valine | 歐洲藥典、美國(guó)藥典 | 72-18-4 |
PanReac AppliChem是來(lái)自歐洲品質(zhì)優(yōu)良的生物化學(xué)試劑與制藥原料生產(chǎn)商之一,已通過(guò)多項(xiàng)ISO 9001質(zhì)量體系認(rèn)證,是全球科研、CRO企業(yè)、大型制藥、診斷、食品、化妝品等工業(yè)企業(yè)的重要供應(yīng)商。作為全球多家培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)和制藥企業(yè)長(zhǎng)期固定供應(yīng)商,AppliChem全面提供細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)、符合藥典級(jí)、生化級(jí)、超純級(jí)等培養(yǎng)基化學(xué)品組分,包括氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素、抗生素、脂類、無(wú)機(jī)鹽、緩沖液、泡沫穩(wěn)定劑、指示劑等和制藥工藝中常用化學(xué)品如尿素、Tris、葡聚糖等。
西美杰是PanReac AppliChem的中國(guó)區(qū)總代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。如對(duì)以上產(chǎn)品感興趣歡迎聯(lián)系我們了解更多信息。
參考文獻(xiàn):
1. Salazar A, Keusgen M , Hagen J V . Amino acids in the c*tion of mammalian cells[J]. Amino Acids, 2016, 48(5).
2. Ritacco F V , Wu Y , Khetan A. Cell culture media for recombinant protein expression in Chinese hamster ovary (CHO) cells: History, key components, and optimization strategies[J]. Biotechnology Progress, 2018, 34(6).