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當前位置:上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>PBS怎么配?
PBS作為生物實驗中的試劑,PBS是磷酸緩沖鹽溶液,一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH、可以緩沖pH等特點。
PBS、蒸餾水和生理鹽水三種溶劑該怎么選擇呢?
蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;而生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)。
在實驗室也常見PB、PBST溶液。PB溶液的成分通常有磷酸鈉和磷酸鉀。若只是化學反應(yīng),用PB溶液就行。在PB的基礎(chǔ)上按照一定比例加NaCl,就可配置PBS;將磷酸鈉和磷酸鉀,NaCl,Tween-20按照一定比例,即可配成PBST溶液。
PBS配置過程
第一步,準備洗干凈的瓶子和配置PBS所需的純水。
第二步,根據(jù)所需要的PBS濃度確定各成分需要的量,不同實驗室要求不一樣,所以成分及用量會有區(qū)別。
第三步,將稱取的藥品加入純水攪拌至溶解。
第四步,將溶液pH調(diào)整至7.4左右。這里不同實驗對溶液pH要求不一樣,細胞部門主要是用于胰酶消化細胞,胰酶在偏堿性環(huán)境活性會強一點,所以細胞部門的pH可以稍微偏高一點,一般實驗使用的話調(diào)整pH 7.2-7.4即可。
第五步,將配好的溶液定容到所需的體積,然后高溫高壓滅菌或者0.22um濾膜過濾除菌。時間充足的可以高溫高壓滅菌,比較著急用的可以直接0.22um濾膜過濾。
第六步,等滅菌的PBS溫度降下來或者過濾了就是無菌的PBS了,擰緊瓶蓋,封上封口膜,就可以放在4度冰箱備用了。
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