離子對試劑的作用原理和使用后的清洗
離子對試劑作用原理
“加入離子對試劑后,它可以與待分析的物質結合成離子對而呈中性,這樣非極性就表現(xiàn)出來,從而在色譜柱上有保留行為。”
覺得離子對試劑很像膠黏劑,一頭以離子吸引住待測物,另一頭以碳鏈與固定性作用,從而把待測物保持在固定相上 。它的優(yōu)點和缺點,都是因為這樣的特性。
“離子對分為正離子對和負離子對,分析酸性樣品用正離子對試劑,分析堿性樣品用負離子對試劑。
離子對試劑可以吸附帶負電荷的樣品組分,負離子對試劑反之。
離子對要考慮樣品體系的復雜性和干擾物的特性,先用原則一般盡可能使用碳鏈短的先,這樣可以避免強保留造成對柱子效能的影響,同時,濃度盡可能的低,以保證對柱子填料的穩(wěn)定性影響小及清洗方便。”
從碳鏈短的開始,從低濃度開始,不行再慢慢加。不過這次的使用經驗是從碳鏈長度中等的開始,可以更快看到效果,節(jié)約摸索分析條件的時間。同時流動相PH值盡可能低以確保離子化程度。
離子對試劑使用后清洗
大家都強調離子對試劑要沖洗較長時間才能洗去。想想也知道那簡直是一定的,使用前平衡了老半天呢,要是輕易就能洗去就怪了。
對于多數(shù)離子對試劑,清洗還是比較簡單的,平時的水——甲醇就能奏效,只是時間必須長點,2小時比較好。
有些例子比較特殊:
“如果用TBA的話應該需要好好洗洗柱子,因為這種胺類的東西不容易洗干凈,且會慢慢溶解硅膠。 通常TBA是用0.1%的磷酸,(其中含有100mM 高氯酸鈉)與甲醇 1:1 來洗。磷酸的作用是調節(jié)pH, 高氯酸鈉可以把胺帶下來,甲醇增加對有機物的溶解度。”
“根據(jù)試驗經驗,SDS在酸中的溶解性較差,因為它是強堿弱酸鹽,在酸性條件下可以生成不溶于水的弱酸十二烷基磺酸,但此酸在有機相中溶解性較好,所以即使在水相中有不溶解的SDS,在加入有機相后反而會使之溶解。所以在流動相中不含有其他鹽時,*可以用比例較高的有機相水洗滌。”