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          上海索寶生物科技有限公司

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          深低溫保藏細胞的解凍

          閱讀:3095      發(fā)布時間:2010-1-18
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          深低溫保藏細胞的解凍
          深低溫保藏的細胞十分脆弱,要輕柔操作??焖俳鈨錾畹蜏乇2?br />的細胞,然后直接將其接種到*生長培養(yǎng)基中,如果細胞對抗
          凍劑(DMSO或甘油)特別敏感,則離心除去抗凍劑,然后將細胞
          接種到*生長培養(yǎng)基中。下面是深低溫保藏細胞的建議解凍步
          驟:
          直接接種法
          1.從凍存管中取出細胞,用37℃水浴快速解凍。
          2.將細胞直接接種到*生長培養(yǎng)基中。每毫升凍存細胞需要 
           10-20ml*生長培養(yǎng)基。計算活細胞的個數(shù)。細胞接種量至
           少要達到3X105 活細胞/ml。
          3.將細胞培養(yǎng)12-24h。更換新鮮*生長培養(yǎng)基以去除抗凍劑。
          離心法
          1.從凍存管中取出細胞,用37℃水浴快速解凍。
          2.將1-2ml 凍存細胞接種到大約25ml*生長培養(yǎng)基中。要非常
          輕柔地進行混合。
          3.用大約80 X g的速度離心2-3分鐘。
          4.吸除上清液。
          5.用*生長培養(yǎng)基輕輕重懸解離下來的細胞,并計算活細胞的
          個數(shù)。
          6.接種細胞。細胞接種量至少要達到3X105 活細胞/ml。

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