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谷氨酸脫羧酶自身抗體1型糖尿病自身抗體
閱讀：753 發(fā)布時(shí)間：2011-11-16胰島素依賴(lài)型糖尿?。?DDM）患者的胰島細(xì)胞郎罕細(xì)胞的自身抗體，在1974年被發(fā)現(xiàn)并命名為胰島細(xì)胞抗體（1CA）。由此激發(fā)了人們努力識(shí)別其靶抗原的熱情。1982年，利用32S標(biāo)記的大鼠胰島細(xì)胞溶解產(chǎn)物與1型糖尿病患者血清進(jìn)行免疫沉淀實(shí)驗(yàn)得到64kD的特異性胰島蛋白，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)64kD蛋白的相應(yīng)抗體可出現(xiàn)在1型糖尿病發(fā)作前期。1988年發(fā)現(xiàn)，谷氨酸脫羧酶作為一個(gè)自身抗原出現(xiàn)于為極為罕見(jiàn)的神經(jīng)疾病即stiflman綜合征（SMS）中，SMS通常與器官特異性自身免疫性疾病（包括1型糖尿?。┫嚓P(guān)，由于上述胰島細(xì)胞中64kD抗原分子量與GAD相似，以此為線索在1990年證明GAD即是IDDM中64kD的自身抗原。
致病作用 現(xiàn)有的證據(jù)表明GAD抗體不是I型糖尿病的致病因素，事實(shí)上，GAD抗體在一定程度上保護(hù)β細(xì)胞避免進(jìn)行性破壞。將I型糖尿病患者的外周單個(gè)核細(xì)胞轉(zhuǎn)移至嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷癥的小鼠，致使一些小鼠產(chǎn)生GAD抗體，但未發(fā)現(xiàn)有β細(xì)胞功能的損傷或胰島細(xì)胞破壞的現(xiàn)象。此外，ICA陽(yáng)性但無(wú)I型糖尿病或胰腺β細(xì)胞胰島素釋放受損人群中可檢出GAD抗體。從：NOD鼠的研究中得到GAD抗體具有保護(hù)作用的線索。在自發(fā)性自身免疫性I型糖尿病NOD模型中，低齡雌鼠出現(xiàn)GAD抗體的頻率和滴度均較高，但發(fā)生糖尿病率較低。但目前也有一些報(bào)道顯示GAD反應(yīng)性T細(xì)胞在NOD鼠發(fā)病中起作用。胸腺內(nèi)、靜脈內(nèi)或腹膜內(nèi)注射GAD65及腹膜內(nèi)注射GAD67可延緩或防止胰島炎和糖尿病的發(fā)生，同時(shí)伴隨GAD反應(yīng)性T細(xì)胞增殖降低。
盡管缺乏GAD對(duì)人類(lèi)工型糖尿病有致病作用的直接證據(jù)，但經(jīng)證敵掄鋃螴型糖尿病患者中存在GAD65反應(yīng)性T細(xì)胞，其T細(xì)胞識(shí)別的部位在GAD65 C末端第473-555氨基酸之間，另外在I型糖尿病患者中檢測(cè)到GAD特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞。
與SMS相比，I型糖尿病的抗體僅與構(gòu)型表位結(jié)合。IDDM：血清能免疫沉淀完整的GAD65分子及包含第188-585氨基酸的大片段多肽，但不能沉淀更小的片段。GAD65的抗原表位靠近第244-585氨基酸，遠(yuǎn)處N末端氨基酸的缺失不影響抗體的結(jié)合性，且GAD65和GAD67有相似的表位。GAD有兩個(gè)*的抗體結(jié)合位點(diǎn)，一個(gè)位于240-435，一個(gè)位于451～570。GAD67的大多數(shù)表位位于蛋白中部或C末端1／3蛋白，與GAD65有高度的同源性，鼠GAD67三個(gè)跨膜片段，經(jīng)ELSIA檢測(cè)均有活性。
GAD與柯薩奇病毒B4的P2-C蛋白的一小段區(qū)域有相似性，可見(jiàn)分子的模擬機(jī)制可能對(duì)GAD性自身免疫疾病中起作用?？滤_奇病毒B4能感染p細(xì)胞是一個(gè)重要的流行病學(xué)線索。此外，柯薩奇病毒B4中含有與GAD分子中的引起T細(xì)胞增殖的抗原表位相同氨基酸序列KXXPEVKEK，這一事實(shí)也支持了分子模擬理論。用16-met柯薩奇P2-C以及包含恒定序列KXXPEVKEK的GAD65多肽免疫小鼠，結(jié)果僅在NOD鼠中出現(xiàn)T細(xì)胞反應(yīng)，在其他9個(gè)鼠系中未見(jiàn)，也僅這一鼠系中發(fā)生了反應(yīng)性T細(xì)胞交叉識(shí)別。由此說(shuō)明鼠T細(xì)胞交叉反應(yīng)性受糖尿病相關(guān)的NODMHCⅡ類(lèi)等位基因I-Ag7限制。證明功能模擬機(jī)制的直接證據(jù)是致病性T細(xì)胞克隆識(shí)別共有序列。在抗體水平發(fā)生分子模擬的基礎(chǔ)是閱讀框內(nèi)有相似的線性序列?？滤_奇病毒感染后鼠血清中存在能夠與GAD65及P2-C蛋白多肽反應(yīng)的抗體，甚至僅識(shí)別GAD65多肽抗體。另外，一些1型糖尿病血清與GAD65蛋白、P2-C和GAD65多肽均可發(fā)生反應(yīng)。但也有一些研究發(fā)現(xiàn)，人源性抗GAD單克隆抗體僅識(shí)別與P2-C同源的GAD65序列，并不與柯薩奇B1-B6來(lái)源的病毒抗原結(jié)合。其他感染原包括分枝桿菌和人熱休克蛋白（hsp60），Ku山in病毒、流行性腦炎病毒、WesternNile病毒和Murray Valley腦炎病毒，也存在與GAD65相似的序列片段，但他們的重要性還不清楚。
IgG亞型可影響T細(xì)胞反應(yīng)特征，因而可能介導(dǎo)免疫病理作用。新診斷為I型糖尿病患者，血清中存在天然的腦GAD IgGl+IgG3抗體，另一方面，ICA陽(yáng)性但不發(fā)展為IDDM的人，血清中抗GAD IgG2+IgG4抗體占優(yōu)勢(shì)，因而GAD抗體IgG亞型的測(cè)定是正確預(yù)計(jì)患1型糖尿病風(fēng)險(xiǎn)的有效方法。
通過(guò)雙胞胎研究發(fā)現(xiàn)，單卵雙生子中一位患l型糖尿病，另一位發(fā)病率13％～34％，而異卵雙生子的發(fā)病率2．5％一5％。由此說(shuō)明遺傳易感性在發(fā)病中起重要作用。遺傳因素也可影響GAD抗體。對(duì)同卵雙生兒的研究中發(fā)現(xiàn)，1型糖尿病的同胞GAD抗體為陽(yáng)性。白種人1型糖尿病的易感基因主要是HLA-DQ3，4及DQ2，8；DR2、DQ6是保護(hù)基因。HLA-DQ2，8與14歲后發(fā)病的1型糖尿病相關(guān)性更大。