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菌種保藏
閱讀:1060 發(fā)布時(shí)間:2010-3-1一、實(shí)驗(yàn)原理
微生物個(gè)體微小、代謝旺盛、生長(zhǎng)繁殖快,如果保存不妥容易發(fā)生變異和雜菌污染,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡等現(xiàn)象。因此,保存好菌種是非常必要和重要的。常用的菌種保藏方法包括傳代培養(yǎng)法、載體法、懸液法、冷凍法和真空干燥法
二、試劑與器材
1、材料 大腸桿菌、青霉菌、放線菌
2、試劑 液體石蠟、甘油、五氧化二磷、95%乙醇、10%鹽酸、無(wú)水氯化鈣、食鹽、干冰
3、器材 無(wú)菌吸管、無(wú)菌滴管、無(wú)菌培養(yǎng)皿;安額管、凍干管、40目與100目篩子、油紙、濾紙條(0.5X1、2cm)、干燥器、真泵器、真空泵、真空壓力表、噴燈、L形五通管、冰箱、低溫冰箱(—30℃)、超低溫冰箱和液氮罐等。
三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、斜面保藏法
2、液體石蠟法
3、穿刺保藏法
4、砂土管保藏法
5、冷凍真空干燥保存法
四、關(guān)鍵步驟及注意事項(xiàng)
1、清楚各種保藏方法的優(yōu)缺點(diǎn),針對(duì)不同要求選擇適宜的保藏方法。
2、熔封安瓶時(shí)防止封閉不嚴(yán)。
3、液氮凍存操作應(yīng)防止凍傷。