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          北京索萊寶科技有限公司

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          狗凝血因子ⅩⅢ Elisa試劑盒操作說明

          閱讀:1412      發(fā)布時間:2011-5-19
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          狗凝血因子ⅩⅢ Elisa試劑盒保存:;2-8℃。
          有效期:6個月

          檢測范圍:4 IU/L -120 IU/L

          使用目的:本試劑盒用于測定狗血清、血漿及相關液體樣本中凝血因子ⅩⅢ(ⅩⅢ)含量。

          狗凝血因子ⅩⅢ Elisa試劑盒標本要求
          1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

          狗凝血因子ⅩⅢ Elisa試劑盒操作步驟
          1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
          120 IU/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
          60 IU/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
          30 IU/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
          15 IU/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
          7.5 IU/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


          2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
          4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
          6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
          7. 溫育:操作同3。
          8. 洗滌:操作同5。
          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
          11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

          狗凝血因子ⅩⅢ Elisa試劑盒注意事項
          1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
          2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
          3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
          4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
          5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          6.底物請避光保存。
          7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
          9.本試劑不同批號組分不得混用。
          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
           

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