在鱟試劑檢驗內毒素試驗中有些樣品嚴重干擾鱟試驗生化反應,甚使反應不能進行。這就需要采用特殊方法對樣品進 行預處理。
1 稀釋法
相當大一部分樣品的干擾因素在一定濃度下才起作用,把樣品適量稀釋后即可按常規(guī)方法測定。如甘露醇、慶大霉素、人血白蛋白、肝素鈉和維生素 C 等注射液等。
2 加熱法
有些干擾因素為不耐熱的物質,將樣品在適當溫度下保溫一段時間,即可按常規(guī)方法測 定。如某些血液制品和生物藥品等。
3 調整 pH 值法
有些樣品 PH 值偏高或偏低,且鱟試劑中 pH 緩沖劑不能將反應液調整正常范圍。這時 可用預先處理并已確認無菌無熱原的鹽酸或氫氧化鈉液調整樣品液 pH。然后按常規(guī)方法測 定, 如氨基酸注射液。
4 超濾─反沖法
一般中草藥注射液成份復雜,干擾因素較多,難以用普通方法加以消除,即可用超濾法。
取樣品適量,進行超濾,樣品藥液全部壓濾通過濾膜,內毒素被阻濾在超濾膜片上,再取少 量無熱原水沖洗濾器、濾膜。卸開濾器,將超濾膜反向放置濾器上,嚴密固定。再用無熱原 水將內毒素從超濾膜上沖一量瓶中,精密加水刻度。沖洗液按常規(guī)方法測定。
5 固體樣品
若固體樣品為可溶性物質,用無熱原水溶解,按上述方法進行干擾樣品試驗。
手術器械、一次性輸液器等固體物品的內毒素測定,用適量無熱原水按規(guī)定方法浸泡或沖洗即可。內毒素的水溶性較大,器具內表面或外表面的內毒素經適當時間、適當溫度浸泡 或沖洗,即可溶入液體,按常規(guī)方法測定。
對于復雜樣品還需將上述各法聯(lián)合應用。但不管單獨用其一法,或二法、三法聯(lián)用,在 操作過程中均有可能出現(xiàn)抑制或增敏等干擾作用,使測定濃度高于或低于實際濃度,這時必 須做回收率實驗,并根據測得的回收率求算內毒素。
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