熒光蛋白上樣緩沖液在進(jìn)行蛋白樣品變性處理的同時(shí)對(duì)蛋白進(jìn)行預(yù)染色,電泳結(jié)束后即可直接使用凝膠成像儀的紫外光源或者LED燈觀察電泳結(jié)果。免去了染色法染色脫色的過(guò)程,不增加任何其它操作步驟,不使用任何有機(jī)溶劑,保護(hù)環(huán)境,實(shí)驗(yàn)室再無(wú)藍(lán)色污漬,電泳結(jié)束即可觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
熒光蛋白上樣緩沖液在使用時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
1. 請(qǐng)勿使用該上樣緩沖液處理預(yù)染的或預(yù)處理的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)。這些產(chǎn)品與不兼容。
2. 靈敏度影響因素:高pH(大于7)不會(huì)影響染色,低pH則會(huì)降低染色的效率,如果樣品的pH低于5,建議將pH調(diào)整7以上。
3. 不適合在如下SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)中使用:切割蛋白條帶用以測(cè)序、質(zhì)譜分析或抗體制備。
4. 建議-20℃避光保存,如果室溫放置2-3周,則可添加新的DTT,蛋白條帶會(huì)重新變得清晰和明亮。添加DTT的終濃度不要超過(guò)20 mM。也可以添加其他還原劑TCEP,效果也很好。
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