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更新時(shí)間:2024-07-27 15:37:45瀏覽次數(shù):1193評(píng)價(jià)
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CAS | 979-88-4 | 純度 | ≥98% |
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分子量 | 388.28 | 分子式 | C20H10N2Na2O4· xH2O |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1g |
貨號(hào) | PC0022 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油,能源 |
主要用途 | 蛋白定量 |
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量
貨號(hào):PC0022
規(guī)格:1g/瓶
說明: 蛋白定量
有效期 1年
英文名稱 BCA
CAS 979-88-4
分子式 C20H10N2Na2O4· xH2O
分子量 388.28
儲(chǔ)存條件 2-8℃
純度 Purity≥98%
外觀(性狀) 白色淡黃色粉末
單位 瓶
蛋白定量
產(chǎn)品簡介:
堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物,測(cè)定其在562nm處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測(cè)結(jié)果,但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
操作說明:
一. 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁,但混勻后就會(huì)消失)。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取10μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋100μL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中,加PBS補(bǔ)足20μL。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋(多做幾個(gè)梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時(shí)誤差偏大,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分鐘。用酶標(biāo)儀測(cè)定A562nm,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時(shí),應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測(cè)結(jié)果。
二. 分光光度計(jì)法 如沒有酶標(biāo)儀,可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下:
1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁,但混勻后就會(huì)消失)。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取100μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋1mL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支(或者更多)5mL離心管,標(biāo)上號(hào),按下表加入試劑。
參考文獻(xiàn):
《Endometrial mesenchymal stem cells isolated from menstrual blood repaired epirubicin-induced damage to human ovarian granulosa cells by inhibiting the expression of Gadd45b in cell cycle pathway》 作者:Zhongrui Yan?, Fengyi Guo?, Qing Yuan?, Yu Shao?, Yedan Zhang?, Huiyan Wang?, Shaohua Hao and Xue Du authorView ORCID ID profile 期刊:Stem Cell Research & Therapy 影響因子:4.963 PMID:30606243
《Isoquercitrin, a flavonoid glucoside, exerts a positive effect on osteogenesis in vitro and in vivo》 作者:JingLiabXuxiaWangacYingziWangabChengyanLudDehuaZhengabJunZhangab 期刊:Chemico-Biological Interactions 影響因子:3.296 PMID:30365939
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量
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