目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>其它系列>> BC3170-50T/48S乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它
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更新時(shí)間：2024-07-29 20:09:20瀏覽次數(shù)：1021評(píng)價(jià)
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| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
| 貨號(hào) | BC3170 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè) |
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
| 試劑四 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
| 試劑五 | 粉劑×1支 | -20℃保存 |
| 試劑六 | 液體95 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑七 | 液體110 μL×1瓶 | -20℃保存 |
| 試劑八 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑九 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
提取液：臨用前將試劑九加入到提取液中，并于2-8℃保存；
試劑二：臨用前每瓶加入4 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；
試劑三：臨用前每瓶加入3 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；
試劑四：臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；
試劑五：臨用前每支加入1 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；
試劑六：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑六、蒸餾水按43:457（V:V）的比例配制備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；
試劑七：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑七、蒸餾水按1:9（V:V）的比例配制備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；
試劑八：臨用前加入5 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；
工作液：吸取0.3 mL 試劑二、1 mL試劑三、0.65 mL試劑四、0.2 mL試劑五、0.2 mL試劑六、0.2 mL試劑七、1 mL試劑八混勻，也可根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配，于冰上備用。
測(cè)定過程中樣本和所有試劑在冰上放置，以免變性和失活。
比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
ΔA大于1時(shí)，建議稀釋后測(cè)量，注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)；ΔA小于0.01時(shí)，建議延長反應(yīng)時(shí)間測(cè)量，注意計(jì)算公式變化。
取0.1g腎臟組織樣本，加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定1-A測(cè)定2=1.893-1.147=0.746，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測(cè)定-ΔA空白= 0.746-0.005=0.741，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：
取500萬大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎，離心，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定1-A測(cè)定2=1.476-1.448=0.028，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測(cè)定-ΔA空白=0.028-0.005=0.023，按細(xì)菌數(shù)量計(jì)算酶活得：
Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.
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