目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>其它系列>> BC1140-50T/48S肌酸激酶活性檢測(cè)試劑盒 其他系列
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更新時(shí)間:2024-07-29 20:12:59瀏覽次數(shù):1155評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
貨號(hào) | BC1140 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 測(cè)定意義:CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆 |
肌酸激酶(CK)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào):BC1140
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1支 | -20℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
試劑四 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
試劑五 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一:臨用前加10 mL蒸餾水溶解;用不完的分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑二:臨用前加入0.5 mL蒸餾水溶解;用不完的分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑三:臨用前取1支加入0.5 mL蒸餾水溶解;用不完的分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑四:臨用前加入0.65 mL蒸餾水溶解;用不完的分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
工作液:臨用前根據(jù)用量將試劑一、試劑二、試劑三、試劑四、試劑五以70:4:7:10:90的比例混合(體積比)?,F(xiàn)用現(xiàn)配。使用前室溫孵育20min(該步驟不可省略)。
產(chǎn)品說(shuō)明:
肌酸激酶(Creatine Kinase,CK) (EC 2.7.3.2)也成為肌酸磷酸激酶,主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷酰基反應(yīng),是一個(gè)與細(xì)胞能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、ATP再生有直接關(guān)系的重要激酶。
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加,以此來(lái)表示CK酶活。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、恒溫水浴鍋、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):
血清的CK不穩(wěn)定,采集樣本后盡快測(cè)定,4℃避光保存可穩(wěn)定24h。
樣本蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定。
OD 值大于0.6可用提取液適當(dāng)稀釋樣本,并在計(jì)算公式中相應(yīng)的改變稀釋倍數(shù)。
ΔA空白管一般不超過(guò)0.01。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取0.1g小鼠腦加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后再用提取液稀釋4倍,之后按照測(cè)定步驟操作,用1mL石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.638-0.149=0.489,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.489-0=0.489,按組織樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:CK活性(U/g 質(zhì)量)=268×ΔA÷W×4(稀釋倍數(shù))=268×0.489÷0.1×4(稀釋倍數(shù))=5242.08 U/g 質(zhì)量。
取鴨血清200μL,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.445-0.423=0.022,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.022-0=0.022,按血清體積計(jì)算酶活得:CK活性(U/mL)=268×ΔA=268×0.022=5.896 U/mL。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
Defang Li, Ning Lu, Jichun Han,et al. Eriodictyol Attenuates Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury through the Activation of JAK2. Frontiers in Immunology. January 2018;(IF3.845)
Xu Y, Meng X, Hou X, et al. A mutant of the Buthus martensii Karsch antitumor-analgesic peptide exhibits reduced inhibition to hNav1. 4 and hNav1. 5 channels while retaining analgesic activity[J].Journal of Biological Chemistry, 2017, 292(44): 18270-18280
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC2030/ BC2035 異檸檬酸裂解酶(ICL)活性檢測(cè)檢測(cè)試劑盒
BC3170/ BC3175 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒
BC3120/ BC3125 植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒
BC4220/ BC4225 4-香豆酸:輔*A連接酶(4CL)活性檢測(cè)試劑盒
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