目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>脂肪酸代謝系列>> BC1980-50T/48S總*固醇(TC)含量檢測試劑盒 脂肪酸
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
貨號 | BC1980 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 總*固醇(TC)含量檢測 |
總*固醇(TC)含量檢測試劑盒 脂肪酸
總*固醇(TC)含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC1980
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 自備試劑 | - |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體400 μL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體70 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
提取液:自備異丙醇,大約需要60mL,常溫保存;試劑盒內(nèi)提供一個30mL棕色空瓶,僅做分裝使用,請自行標(biāo)注試劑名稱。
標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg膽*醇,臨用前加入517 μL提取液,振蕩溶解,即為50 μmol/mL的膽*醇標(biāo)準(zhǔn)品,2-8℃可保存4周。
試劑三:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中,使用前用掌上離心機將液體甩離至底部。
工作液的配制:根據(jù)樣本量將試劑一:試劑二:試劑三按9mL:60μL:9μL(約10T)的比例配制工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。
產(chǎn)品說明:
總*固醇(Total Cholesterol,TC)是指所有脂蛋白所含膽*醇的總和,包括游離膽*醇和膽*醇酯。
利用酯酶催化膽*醇酯水解生成游離膽*醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽*醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進一步利用膽*醇氧化酶催化FC氧化,生成4-膽甾烯酮和H2O2;最后利用過氧化物酶催化 H2O2氧化4-氨基安*比林和酚,生成紅色醌類化合物,其在500nm有特征吸收峰,其顏色深淺與TC含量成正比。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.01 μmol/mL
線性范圍:0.019-1.25 μmol/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、天平、低溫臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、可調(diào)式移液槍、EP管、冰、蒸餾水、異丙醇(AR,98%)。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者用提取液稀釋樣本(血清(漿)用蒸餾水稀釋)后再進行測定。注意同步修改計算公式。
提取液中含有使蛋白變性的成分,故按蛋白濃度計算時需要重新提取蛋白進行測定。
實驗實例:
取0.1054g大鼠腎臟加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A空白=0.595-0.053=0.542,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7703x-0.0021,R2=0.9985,計算x=0.706,按樣本質(zhì)量計算含量得:
TC含量(μmol/g 質(zhì)量)=x÷W×F =6.698 μmol/g 質(zhì)量。
取5×106個BNL細胞加入1mL提取液進行超聲破碎,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A空白=0.141-0.053=0.088,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7703x-0.0021,R2=0.9985,計算x=0.117,按細胞數(shù)量計算含量得:
TC含量(μmol/106 cell)= x÷N×F =0.0234 μmol/106 cell。
取人血清樣本,直接按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A空白=0.404-0.041=0.363,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7703x-0.0021,R2=0.9985,計算x=0.474,按血清(漿)等液體體積計算含量得:
TC含量(μmol/dL)=x×100×F =47.4 μmol/dL
相關(guān)發(fā)表文獻:
Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,et al. Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus). International Journal of Biological Macromolecules. April 2019; 127:178-186. (IF4.784)
Wei Hu, Rui Wei, LiYue Wang,et al. Correlations of MMP-1, MMP-3, and MMP-12 with the degree of atherosclerosis, plaque stability and cardiovascular and cerebrovascular events. EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE. 2018;(IF1.448)
Jieyong Xing,Yanshao Liu,Tao Chen,et al. Correlations of chemokine CXCL16 and TNF-α with coronary atherosclerotic heart disease. Experimental and Therapeutic Medicine. November 2017;(IF1.448)
Jiabin Huang,Shangjun Chen,Dongliang,et al. Long noncoding RNA lncARSR promotes hepatic cholesterol biosynthesis via modulating Akt/SREBP-2/HMGCR pathway. Life Sciences. June 2018;(IF3.448)
Li W, Li Y, Zhao Y, et al. The protective effects of aloperine against ox-LDL-induced endothelial dysfunction and inflammation in HUVECs[J]. Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology, 2020, 48(1): 107-115.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1890/BC1895 游離膽*醇(FC)含量檢測試劑盒
BC0590/BC0595 游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒
BC0750/BC0755 乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測試劑
總*固醇(TC)含量檢測試劑盒 脂肪酸
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