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TEV蛋白酶 哪里容易買到
貨號:TEVDAB-1000U
規(guī)格:1000u
品牌:solarbio
別名 : rTEV
英文名稱 : rTEV
儲存條件 : -70℃/-20℃
單位 : 支
外觀(性狀) : 凍干粉
產(chǎn)品說明:
rTEV蛋白酶(重組型)是經(jīng)過基因工程改造后的重組蛋白酶,該酶特異性識別Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。rTEV蛋白酶與腸激酶U(EK)、Thrombin、Factor Xa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性、高特異性的雙重特點,rTEV蛋白酶因具有高剪切活性和特異性,已成為融合蛋白表達(dá)后去除融合tag的*蛋白酶。該酶經(jīng)6×His標(biāo)簽純化而得(含組氨酸標(biāo)簽),純度達(dá)99%,剪切反應(yīng)完畢后可通過Ni-NTA Resin(Cat.No.P2010, Solarbio)去除。該酶在2-8℃-30℃溫度、pH范圍(6.0-8.5)反應(yīng)條件下均具有活性
活性定義: 在1XrTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA, 1mM DTT),30℃反應(yīng)1h,剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。
保存條件: 長期儲存-70℃,可儲存1年,-20℃,可儲存6個月。
該酶經(jīng) 6×His 標(biāo)簽純化而得(含組胺酸標(biāo)簽),純度達(dá)99%, 剪切反應(yīng)完畢后可通過His標(biāo)簽純化樹脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除,以達(dá)到純化目的蛋白的目的。
表1. 不同溫度下rTEV酶切活性
反應(yīng)時間 | 不同溫度下剪切活性(%) | |||
4°C | 16°C | 21°C | 30°C | |
1 h | 34 | 58 | 56 | 70 |
2 h | 58 | 80 | 78 | 90 |
3 h | 71 | 99 | 99 | 99 |
3.5h | 84 | 99 | 99 | 99 |
影響天然TEV酶活性的常見因素:1)PMSF和AEBSF(1 mM),TLCK(1 mM),Bestatin(1 mg/ml)、Pestatin A(1 mM),EDTA(1 mM)以及E-64(3 mg/ml),以上這些蛋白酶抑制劑對rTEV的活性沒有影響;2)Zn離子(>5 mM)對rTEV活性有抑制;3)與半胱氨酸反應(yīng)的試劑也是rTEV的潛在抑制劑。
表達(dá)方式: A DNA sequence encoding the TEV Protease (NP_062908) (Gly 2038- Gly 2280) was fused with polyhistidine tag at the N-terminus, with a Ser 2256 Asn mutation
種屬:Human
表達(dá)宿主: E.Coli
QC Testing
純度:> 95%, as determined by SDS-PAGE
內(nèi)毒素:< ﹤1.0 EU per 1μg cytokine as determined by the LAL method.
穩(wěn)定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt -70°C
預(yù)測N端: Met 1
分子量:The recombinant human TEV protease consists of 251 amino acids and has a predicted molecular mass of 28.6 kDa. As estimated in SDS-PAGE under reducing conditions.
緩沖液: Supplied as a 0.2μm filtered solution of 50mM Tris, 10%Sucrose,5mM DTT pH8.0
SDS-PAGE:
Usage Guide
儲存方法:Store it under sterile conditions at -70℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage and usage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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