目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC0025-100T/96S丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 微量法
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更新時(shí)間:2024-08-01 15:19:30瀏覽次數(shù):2948評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 |
貨號(hào) | BC0025 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 丙二醛(MDA)含量檢測(cè) |
丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào):BC0025
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體42 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
MDA檢測(cè)工作液的配制:臨用前取1瓶試劑二加入20mL試劑一,溶解混勻,2-8℃保存一個(gè)月。MDA檢測(cè)工作液較難溶解,可以70℃加熱,并劇烈振蕩以促進(jìn)溶解,或者通過超聲處理以促進(jìn)溶解。
產(chǎn)品說明:
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括丙二醛(MDA)。通過檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
丙二醛(MDA)在酸性和高溫條件下,可以與硫代巴*(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成棕紅色的三甲川(3,5,5-三甲基惡唑-2,4-*酮),其最大吸收波長在532nm。進(jìn)行比色后可估測(cè)樣本中MDA的含量。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取馬血清按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA532=A532測(cè)定-A532空白=0.078-0.047=0.031,ΔA600=A600測(cè)定-A600空白=0.053-0.043=0.01,ΔA=ΔA532-ΔA600=0.021按體積計(jì):
MDA含量(nmol/mL)=53.763×ΔA×F =1.129 nmol/mL。
取500萬hela細(xì)胞,加1mL提取液進(jìn)行樣本處理,離心取上清后按測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA532=A532測(cè)定-A532空白=0.101-0.046=0.055,ΔA600=A600測(cè)定-A600空白=0.043-0.043=0,ΔA=ΔA532-ΔA600 = 0.055,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
MDA含量(nmol/104 cell)=0.1075×ΔA×F =0.006nmol/104 cell
取0.1g 小鼠肝臟,加1mL提取液進(jìn)行樣本處理,離心取上清后按測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA532=A532測(cè)定-A532空白=0.196-0.047=0.149,ΔA600=A600測(cè)定-A600空白=0.125-0.043=0.082,ΔA=ΔA532-ΔA600= 0.067,按照樣本質(zhì)量計(jì)算:
MDA含量(nmol/g 質(zhì)量)= 53.763×ΔA÷W×F =36.02 nmol/g 質(zhì)量
參考文獻(xiàn):
[1] Spitz D R , Oberley L W . An assay for superoxide dismutase activity in mammalian tissue homogenates[J]. Analytical Biochemistry,1989
[2] Masayasu M , Hiroshi Y . A simplified assay method of superoxide dismutase activity for clinical use[J]. Clinica Chimica Acta.
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丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 微量法 丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 微量法
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