目錄:北京索萊寶科技有限公司>>染料/染色劑>>染色液>> G3061GUS染色液(即用型)
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更新時(shí)間:2024-08-01 19:51:26瀏覽次數(shù):1565評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品內(nèi)容
名稱 20ml Storage
試劑(A): X-Gluc Solution(50×) 400µL -20 ℃ 避光
試劑(B): GUS Buffer 20ml 4 ℃ 避光
X-Gluc(X-GlcA)分子量為 521.8,CAS 號(hào)為 18656-96-7,是檢測(cè)大腸桿菌中 GUS 基因的底物,可快速檢測(cè)植物中 GUS 基因融合標(biāo)記。GUS 染色液在適宜的反應(yīng)條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc 水解成藍(lán)色物質(zhì),該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì),具有 GUS 活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn),可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS 染色液多用于轉(zhuǎn)基因植物的 GUS基因表達(dá)分析。
操作步驟(僅供參考) :
1、 配制 X- Gluc 染色液:取適量 X-Gluc Solution(50×)和 GUS Buffer,按 1:50 比例充分混勻,配制成X- Gluc 染色液,如取200ul X-Gluc Solution(50×)加入到10ml GUS Buffer中,即配成10ml GUS染色液,該染色液好現(xiàn)配現(xiàn)用,短期可 4℃保存 3d。
2、 取適量待染液片等組織加入適量 GUS 染色液,使 GUS 染色液*浸沒(méi)組織。
3、 37℃孵育 1-24h。隨著孵育時(shí)間的延長(zhǎng),藍(lán)色漸漸出現(xiàn),當(dāng)表達(dá)量較高時(shí),GUS 活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)。
4、 用 70%乙醇脫去樣本的葉綠素,一般樣本浸沒(méi)于乙醇 1-3h,陰性對(duì)照呈白色。如有必要可重復(fù)該脫色步驟,以便*清除葉綠素。樣本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光學(xué)顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色即為 GUS 表達(dá)位點(diǎn)。
注意事項(xiàng):
1、 配制好的 GUS 染色液可以 4℃避光保存 3d。
2、 X-Gluc Solution(50×)應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則染色效率會(huì)下降。
3、 由于組織特異性等原因,藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不**,應(yīng)注意摸索具體實(shí)驗(yàn)條件。擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí),可以選真空滲入法來(lái)幫助底物滲入細(xì)胞,建議使用 GUS 染色液(G3060)。
4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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