首頁(yè) >> 供求商機(jī)
貨物所在地:北京北京市
所在地: 北京
更新時(shí)間:2024-09-08 21:00:06
瀏覽次數(shù):146
在線詢價(jià)收藏產(chǎn)品( 聯(lián)系我們,請(qǐng)說(shuō)明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝!)
蛋白質(zhì)提取試劑高效RIPA組織/細(xì)胞快速裂解液
貨號(hào) :R0010
規(guī)格 :20ml/100ml
本產(chǎn)品配有一支 PMSF(0.3ml/1.5ml)
保存 :RIPA 裂解液 4℃保存,PMSF-20 ℃保存。
使用說(shuō)明:
如發(fā)現(xiàn) RIPA 有沉淀,請(qǐng)放室溫半小時(shí)或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據(jù)使用量, 取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。 混勻備用 (PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把組織剪切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液, 如果需要高濃度的蛋白樣品, 可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。
用玻璃勻漿器勻漿,直充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘, 取上清, 即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、 SDS-PAGE、 Western blotting 和免疫沉淀等操作。
注意事項(xiàng) :
本試劑為強(qiáng)烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同時(shí),也會(huì)將基因組一并釋放出來(lái),若細(xì)胞量多會(huì)造成細(xì)胞裂解液粘稠:此時(shí)可以直接加入蛋白上樣緩沖液,煮沸再離心,離心后直接上樣電泳;若想測(cè)定濃度,可入加少量 SDS(1%) ,煮沸后離心測(cè)濃度。本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,所以不適合使用 Bradford 蛋白濃度測(cè)定試劑盒,請(qǐng)選擇 BCA 法或者 Lowry 法檢測(cè)蛋白濃度。
如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過(guò)超聲處理打碎打散粘稠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
相關(guān)產(chǎn)品 :
P1020 1×PBS , PH7.2-7.4 , 0.01M
R0020 RIPA 組織細(xì)胞裂解液
R0030 非變性組織細(xì)胞裂解液
P1015 4× 蛋白上悪緩沖液(含 DTT )
PC002 BCA 法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
PC0030 Lowry 法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
P1300 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
蛋白質(zhì)提取試劑高效RIPA組織/細(xì)胞快速裂解液訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
蛋白質(zhì)提取試劑高效RIPA組織/細(xì)胞快速裂解液運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)