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糖異生系列 丙酮酸羧化酶（PC）測(cè)試盒
貨號(hào)：BC0730
規(guī)格：100管/96樣
測(cè)試方法：微量法

測(cè)定意義：
    丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、霉菌和酵母的線粒體中，催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，是糖異生過(guò)程的*個(gè)限速酶，在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。

測(cè)定原理：
    PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，蘋(píng)果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋(píng)果酸和NAD+，在340nm下測(cè)定NADH氧化速率，即可反映PC活性

需自備的儀器和用品：
    分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、 樣本的前處理組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離： 1、 稱取約0.1g 組織或收集500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞，加入1mL 提取液，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。 2、 將勻漿600g，4℃離心5min。 3、 棄沉淀，將上清液移另一離心管中，11000g，4℃離心10min。 4、 上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的PC（此步可選做）。 5、 在步驟④的沉淀中加入1mL 提取液，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10 秒，重復(fù)30 次），用于線粒體PC 活性測(cè)定。

二、測(cè)定步驟 1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 工作液的配制：臨用前將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用；置于37℃(哺乳動(dòng)物) 或25℃(其它物種)預(yù)熱5 分鐘；用不完的試劑4℃保存一周；試劑四的配制：在試劑四瓶中加入2.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一周；

3、 在1mL 石英比色皿中加入50μL 樣本、50μL 試劑四和900μL 工作液，立即混勻，記錄340nm 處初始吸光值A(chǔ)1 和 2min 后的吸光值A(chǔ)2，計(jì)算A=A1-A2。注意：在該試劑盒中，若ΔA 大于0.5，需將樣本用提取液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后測(cè)定，使ΔA 小于0.5 可提高檢測(cè)靈敏度。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

糖異生系列 丙酮酸羧化酶（PC）測(cè)試盒訂購(gòu)說(shuō)明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運(yùn)輸說(shuō)明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。