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        1. 上海研謹生物科技有限公司

          當前位置:上海研謹生物科技有限公司>>酶聯免疫試劑盒(種屬)>>大鼠ELISA試劑盒>> F00138大鼠,血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒

          大鼠,血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒

          訂       金: 1800

          訂  貨  量: ≥1 

          具體成交價以合同協議為準

          產品型號F00138

          品牌

          廠商性質經銷商

          所在地上海市

          更新時間:2016-06-20 20:07:36瀏覽次數:674次

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          大鼠,血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒原裝/分裝等各種品牌價格檔次的ELISA試劑盒,品種多,質量好,靈敏度高。并提供免費代檢測服務(為您節(jié)省時間)
          具體詳情請。

           目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)的含量。
          實驗原理:
            本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)水平。用純化的大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1),再與HRP標記的血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)濃度。

          試劑盒組成:
          試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
          說明書 1份 1份 
          封板膜 2片(48) 2片(96) 
          密封袋 1個 1個 
          酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
          標準品:270ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
          標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
          酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
          樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
          顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
          顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
          終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
          濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

          樣本處理及要求:
          1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
          2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
          3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
          4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
          5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
          6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
          7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

          操作步驟:
          1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120ng/L ,60ng/L,30 ng/L,15 ng/L)。
          2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
          4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
          6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
          7. 溫育:操作同3。
          8. 洗滌:操作同5。
          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
          11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

          注意事項:
          1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
          2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
          3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
          4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
          5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          6. 底物請避光保存。
          7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
          8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
          9. 本試劑不同批號組分不得混用。
          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

          計算:
          以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
          在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
          值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
          倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
          準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
          代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
          倍數,即為樣品的實際濃度。
          試劑盒性能:
          1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。
          2.批內與批見應分別小于9%和11%

          檢測范圍:
          5ng/L -200 ng/L

          保存條件及有效期:
          1.試劑盒保存:;2-8℃。
          2.有效期:6個月

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