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        1. 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

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          大鼠D二聚體(D2D)ELISA試劑盒

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          訂  貨  量: ≥1 

          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          產(chǎn)品型號(hào)F05269

          品牌

          廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

          所在地上海市

          更新時(shí)間:2016-07-21 23:58:43瀏覽次數(shù):813次

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          具體詳情請。

           

          實(shí)驗(yàn)原理:
             本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠D二聚體 (D2D)水平。用純化的大鼠D二聚體 (D2D)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D二聚體 (D2D),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D二聚體 (D2D)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠D二聚體 (D2D)濃度。
          樣本處理及要求:
          1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
          2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
          3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
          4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
          6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
          7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          注意事項(xiàng):
          1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
          2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
          3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
          4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
          5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          6. 底物請避光保存。
          7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
          8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
          9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

          計(jì)算:
          以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
          在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD
          值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
          倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
          準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
          代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋
          1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。
          2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%

          檢測范圍:
          1000 pg/ml - 4500pg/ml

          保存條件及有效期:
          1.試劑盒保存:;2-8℃。
          2.有效期:6個(gè)月

          大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA

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          大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)試劑盒說明書

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          大鼠補(bǔ)體4(C4)試劑盒說明書

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