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研域生物血清的作用:
1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7.參與細(xì)胞凍存。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定適宜濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。
雖然血清也存在一些弊端,比如存在不少有害成分(補(bǔ)體、免疫球蛋白和一些生長抑制因子等),血清成分不明確,影響對結(jié)果的分析,不同動(dòng)物、不同批次的血清成分和活性有很大不同,使得培養(yǎng)結(jié)果不穩(wěn)定,盡管如此,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。
血清注意:
在水浴過程中,血清的平面要浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動(dòng)瓶身,使血清混勻,但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫!
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