ABI Veriti PCR儀售后維修與使用操作步驟:
ABI Veriti PCR儀操作步驟
1、打開PCR儀的熱蓋,插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。
2、打開PCR儀的電源,儀器程序開始初始化,需等待幾分鐘。
3、初始化完成后,顯示主菜單:
4、點“Browse/New Methods",進入PCR程序列表:
5、可以直接點一個PCR程序,選擇“Start Run"運行;點右邊的符號,可以選 擇不同的文件夾。如要新建一個PCR程序,點“New",出現(xiàn)PCR程序:
6、添加一段程序:點中上方的“Stage"位置,該位置變紅;再點“Add",軟件將加入一段新的程序。
7、修改循環(huán)數、溫度、時間:點中循環(huán)次數、溫度或時間位置,下方出現(xiàn)數字鍵。依次點數字鍵,出現(xiàn)合適數字后,點“Done"確定。
8、增加一個步驟:點“Step"位置,該位置變紅;再點“Add",軟件將加入一個新的步驟。
9、刪除一個步驟:點“Step"位置,在點“Delete",軟件將該步驟刪除。
10、建立梯度模式:
1)點中一個步驟,再點“Option"鍵,出現(xiàn)選項如下
2)點“VeriFlex step",出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:
輸入6個梯度溫度,溫度下方的“1-2"是指對應的1、2兩行加熱孔,全部輸好后,點“Done"確定。注意:相鄰的兩個梯度溫度之差不能超過5℃!
11、建立漸變模式:
1)點中一個步驟,再點“Option"鍵,出現(xiàn)選項如下
2)點“Auto Delta",出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口。
點“Staring Cycle",輸入起始循環(huán)數;點“Delta Temperature",輸入溫度變化值;點“Delta Time",輸入時間變化值。漸變模式適用于touchdown PCR,可以提高PCR反應的特異性。例:輸入起始循環(huán)數為2,溫度變化值為+0.5℃,時間變化值為+5s,則表示從第2個循環(huán)開始,每循環(huán)一次升溫0.5℃,時間增加5S.
12、增加暫停步驟:
1)點中一個步驟,再點“Option"鍵,出現(xiàn)選項如下
2)點“Pause",出現(xiàn)如下窗口。
輸入暫停的起始位置,暫停間隔和暫停時間,點“Done"確定。上圖表示每隔10個循環(huán)暫停10s,在10個循環(huán)的第1個循環(huán)之前暫停。
13、編輯PCR程序完成后,點“Save"保存。
點“Run Method",輸入PCR程序名稱;點 ,選擇保存PCR程序的文件夾(如 果要保存在USB文件夾中,需要先插U盤)。再輸入反應體積和熱蓋溫度(這兩項在運行程序時可以修改)。點“SaveδExit"確定。
14、回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序。
15、點“Start Run",出現(xiàn)運行參數設置窗口
輸入反應體積和熱蓋溫度,點“Start Run Now"開始運行PCR程序。
16、儀器運行選中的PCR程序,顯示運行監(jiān)視窗口
A- 運行狀態(tài)欄,顯示運行溫度和剩余時間
B- 加熱警示標記
C- 階段指示
D- 步驟溫度
E- 步驟時間
F- 步驟指示
G- 狀態(tài)報告,顯示日期、時間和儀器狀態(tài)
H- 延伸箭頭,點箭頭可以顯示更多的步驟
16、暫停運行: 點“Pause Run",儀器暫停,出現(xiàn)暫停選項欄
“Remaining Time"顯示暫停剩余時間,“Elapse Time"顯示已暫停時間。
如果需要修改暫停時間,點 ,輸入時間值,點“Done"確定;點“Resume Run", 結束暫停,繼續(xù)運行PCR程序。
7、終止運行:點“Stop"可以終止整個PCR程序。
18、反應報告:
PCR程序結束后,儀器會自動生成反應報告,顯示當次反應的各項指數。該報告可以保存和打印。
19、PCR反應結束后,打開熱蓋,取出樣品,關閉儀器電源。并開蓋放置,使熱蓋和加熱模塊正常降溫。
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