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技術(shù)文章
淋巴細(xì)胞分離液
點(diǎn)擊次數(shù)：5254 發(fā)布時(shí)間：2012-1-14
淋巴細(xì)胞分離液
| 產(chǎn)品編號(hào) | 包裝 | 價(jià)格 |
| 130010-L | 60ml | 86.00 |
| 130010-L1 | 120ml | 125.00 |
| 130010-L2 | 200ml | 190.00 |
淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異，借助離心產(chǎn)生的重力加速度，進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。從外周血、骨髓、外周淋巴器官或各種組織分離出來的細(xì)胞是多種細(xì)胞的混合物，如要研究某種特定細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能或表面標(biāo)志等特征，首先要分離純化細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞的大小、密度、表面荷電、吸附能力或表面抗原的差異可實(shí)現(xiàn)對(duì)目的細(xì)胞的分離、純化，常用的細(xì)胞分離與純化方法有密度梯度沉降法、細(xì)胞電泳、貼附、親和層析、花環(huán)形成、補(bǔ)體介導(dǎo)殺傷溶解以及流式細(xì)胞儀（FCM）和免疫磁珠分選等。密度梯度沉降法是根據(jù)細(xì)胞密度差異，借助細(xì)胞分離液和離心，進(jìn)行細(xì)胞分離純化的常用方法之一。細(xì)胞分離液則是一類能產(chǎn)生一定程度的密度梯度，高密度時(shí)粘度不高，濃度不同時(shí)滲透壓變化不大，經(jīng)洗滌去除后能用于體外培養(yǎng)，而對(duì)細(xì)胞沒有毒性。zui常用的細(xì)胞分離液有Ficoll和Percoll。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，吸水性強(qiáng)，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞，就可從外周血中分離到單個(gè)核細(xì)胞。
賽馳生物生產(chǎn)的淋巴細(xì)胞分離液（Lymphocytes Separation Medium）以Ficoll和泛影酸鈉為主原材料，配制成密度為1.077的，無菌溶液。該產(chǎn)品適用于人淋巴細(xì)胞和大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的分離純化，能除去紅細(xì)胞和死細(xì)胞碎片。
包裝清單
2-8℃避光保存。
使用說明
1.在離心管中加入適量。
2.取抗凝血（無溶血）與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持兩液面界面清晰，水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后，管內(nèi)液體分為三層，上層為血漿和Hank’s液，下層主要為紅細(xì)胞和粒細(xì)胞。中層為，在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶，即為富含淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）及血小板。
4.吸去zui上層的血漿，收集血漿層和交界面的單個(gè)核細(xì)胞，盡量全部吸出PBMC，移入一新的離心管中；
2.取抗凝血（無溶血）與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持兩液面界面清晰，水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后，管內(nèi)液體分為三層，上層為血漿和Hank’s液，下層主要為紅細(xì)胞和粒細(xì)胞。中層為，在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶，即為富含淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）及血小板。
4.吸去zui上層的血漿，收集血漿層和交界面的單個(gè)核細(xì)胞，盡量全部吸出PBMC，移入一新的離心管中；
5.加入Hanks’液或無血清培養(yǎng)液，混勻后離心200×g 10分鐘，棄去上清液（低速離心有利于去除細(xì)胞懸液中留存的血小板）。
6.再用同樣洗滌液洗滌細(xì)胞2次，每次離心500×g 10分鐘，以洗去殘留的。再用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞調(diào)配成適當(dāng)濃度。通常，每毫升外周血可得1～2×106PBMC
| 產(chǎn)品編號(hào) | 130010-L | 130010-L1 | 130010-L2 |
| 60ml | 120ml | 200ml | |
| 說明書 | 1 份 | ||
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