UVP紫外交聯(lián)儀CL-1000/CX-2000/CL-3000

UVP 紫外交聯(lián)儀---基于紫外原理的應(yīng)用拓展

紫外簡介

紫外線是跨100-400 nm的電磁光譜的一部分。 紫外線光譜分為三類：UVA，UVB和UVC（Table 1）。 在光線通過大氣層到達地球表面的過程中，短波UVC會被分子氧吸收，而長波UVA和中波UVB則可穿過大氣到達地球表面。

任何經(jīng)歷過曬傷的人都可證明紫外線對人體的危害。盡管如此，從對生命科學(xué)的基本研究到臨床衛(wèi)生設(shè)施消毒殺菌等，紫外在協(xié)助改善人類健康方面依然功不可沒。

Table 1. 紫外波長

*Analytik Jena無Vacuum UV相關(guān)紫外產(chǎn)品

120年前，紫外線就已被用于防止物體表面微生物的生長，空氣中微生物的破壞以及液體滅菌。例如，自1877年以來，人類就將紫外線用于食品的保存/消毒。 1930年代，手術(shù)室開始使用紫外線對空氣進行消毒。自二十世紀以來，紫外線已用于對飲用水進行消毒。上述應(yīng)用中均利用了紫外線的生物毒性。

在分子水平上，在紫外線照射下，核酸鏈中相鄰的嘧啶可發(fā)生二聚化，主要發(fā)生在胸腺嘧啶堿基之間。 近一百年來，研究人員一直利用紫外線的這種特性作為研究基因突變的工具。 實際上，如果早先嘗試利用紫外線的誘變特性，那么紫外線誘發(fā)的突變（而非X射線誘發(fā)的突變）將與赫爾曼·穆勒（Herman Muller）1928年具有里程碑意義的飛行實驗有關(guān)，后來該實驗獲得了1946年諾貝爾獎-畢竟， 紫外線在他的職業(yè)生涯后期成為實驗室中的流行策略。 但可惜的是，研究人員遲遲未能確定賦予誘變特性的最佳紫外光波長（即254 nm或UVC）。

在穆勒（Muller）具有里程碑意義的工作發(fā)生之前大約十年，研究人員觀察到滴定的蛋白質(zhì)溶液可在紫外光的照射中產(chǎn)生凝結(jié)。蛋白質(zhì)研究人員后來了解到導(dǎo)致產(chǎn)生這種凝結(jié)的潛在機制是色ansuan殘基的改性和二硫鍵的破壞。總而言之，這些發(fā)現(xiàn)為分子和細胞生物學(xué)以及其他領(lǐng)域中基于紫外線的應(yīng)用鋪平了道路。

自1993年以來，我們一直使用UVA，UVB和UVC光制造UVP紫外交聯(lián)儀，以覆蓋圖1中概述的一系列紫外應(yīng)用。

這些應(yīng)用包括：

※ 突變生物學(xué)（紫外線誘導(dǎo)的突變，存活率測定，壓力測定）

※ 膜交聯(lián)（Northern/Southern blotting, EMSA）

※ 雙分子交聯(lián)（CLIP-seq, iCLIP-seq, PAR-CLIP-seq, pBpa, sulfo-SDA, psoralen）

※ 微生物滅活（例如細菌，真菌，病毒）

※ 聚合物固化（例如水凝膠，甲基丙烯酸甲酯樹脂）

※ 光穩(wěn)定性驗證

Figure 1. 紫外交聯(lián)儀應(yīng)用分類

這些應(yīng)用依賴于高強度，可重現(xiàn)的紫外照射。 我們的最新型號：UVP紫外交聯(lián)儀CL-3000（圖2A），采用內(nèi)置的輻射計進行紫外能量測量，該輻射計已按照NIST溯源標準進行了校準-無論空間和時間如何，均可確保照射量一致。 此外，CL-3000可以發(fā)出高達10 J/cm2的累積能量。 通過使反射罩和紫外線源靠近樣品，以實現(xiàn)高度均勻的輻照（圖2B和2C）。 整個輻照表面的變化系數(shù)為17.3％，而輻照面的中心為6.0％。 與我們所有的儀器一樣，用戶的安全至關(guān)重要，我們所有的交聯(lián)儀均裝有安全聯(lián)鎖裝置，以防止紫外泄露。

UVP Crosslinker CL-3000 使用

UVP交聯(lián)儀CL-3000能夠以時間或能量/劑量（mJ / cm²）兩種模式提供用戶輸入。 考慮到燈泡的壽命以及環(huán)境變量會影響紫外線輸出，因此我們建議用戶能量模式進行實驗。 在科學(xué)文獻中，用戶會發(fā)現(xiàn)兩者都被使用了。 若文獻中標注了能量照射量，則用戶可以簡單地轉(zhuǎn)換為mJ / cm²（儀器輸入的度量單位）。 示例轉(zhuǎn)換如后圖所示。

Figure 2. 254 nm UVP紫外交聯(lián)儀的均勻性。

A）UVP CL-3000紫外交聯(lián)儀主機照片。

B）以總焦面（Total CV）和照射面中心（Center CV）的形式描述了集成輻射計讀數(shù)的位置，單位為mJ / cm²，具有尺寸和報告的變異系數(shù)（CV）計算。

C）輻射計讀數(shù)的箱須圖摘要。 總CV：平均值= 104.9，標準差= 18.16； 中心CV：平均值= 117.9，標準差= 7.1。 我們建議用戶將樣本放在照明表面的中心。 放置在中心的樣品將至少接收輸入能量劑量。 如果用戶要將樣品放在最前面和最后面的位置，我們建議購買254nm UVP輻射計（P / N 97-0015-02）和傳感器（97-0016-01）來校準劑量。

如果報告了輸出的照射功率，通常以μW / cm²為單位，則該值將伴有曝光時間。 用戶將需要將Fluence Rate轉(zhuǎn)換為mW /cm²（請參見表2中Fluence Rate下的示例轉(zhuǎn)換）。 此外，需要將曝光時間轉(zhuǎn)換為秒（例如10分鐘= 600秒）。 請參考下列的示例及計算。

示例

將甲流病毒在1000uw/cm²的紫外環(huán)境中曝光10min。將此報告中的紫外線劑量轉(zhuǎn)換為mJ/cm²。

公式 1.

能量單位換算

功率單位換算

Table 2. 紫外輻照能量單位的重要換算

*文獻中的值通常以mJ / cm2或J / m2的通量進行報告。 在某些情況中，Paper中會用功率單位描述通量（例如μW / cm2），在這種情況下，用戶應(yīng)使用公式1確定通量（或劑量）。

樣本放置位置

實驗中，我們建議用戶將樣本置于輻照面中間位置，居中位置的CV值較小（6%） (Figure 2B, 2C). 放置在中心的樣品接受輸入能量的劑量損失較小。由于邊緣效應(yīng)，放置在最前和最后位置的樣品接收的輻照劑量將少于輸入劑量。 如果用戶要校準邊緣的紫外強度，我們建議購買254 nm的UVP輻射計（P / N 97-0015-02）和傳感器（97-0016-01），以確定照射面上的紫外強度。 例如，當我們輸入100 mJ / cm²時，圖2B將最前面和最右邊的位置顯示為強度（78.18 mJ /cm²）。 因此，用戶可以考慮輸入更高強度（例如125 mJ / cm²）以抵消邊緣效應(yīng)。

技術(shù)參數(shù):

UVP紫外交聯(lián)儀CL-1000/CX-2000/CL-3000訂貨號:

CL-1000開門型紫外交聯(lián)儀

1.可預(yù)設(shè)或手動調(diào)節(jié)紫外強度和曝光時間

2.最高UV能量設(shè)置可達999.9mj/cm

3.5個254nm的短波紫外燈管

4.LED顯示時間/能量

5.紫外安全門鎖設(shè)計

6.紫外安全視窗

CL-1000L 型 365紫外燈管

CL-1000M 型 302紫外燈管

內(nèi)部尺寸 254x127x305mm

外部尺寸 396x216x348mm

選配件：

CL-1000     34-0042-01 302nm紫外燈管

CL-1000M  34-0007-01 254nm紫外燈管

CL-1000L    34-0006-01 365nm紫外燈管

應(yīng)用：

核酸的膜固定、EB染色的DNA缺刻、利用胸腺嘧啶二聚體抑制切割進行基因作圖、檢測recA 功能、紫外滅菌、PCR污染消減等

CX-2000抽屜型紫外交聯(lián)儀

1.可預(yù)設(shè)或手動調(diào)節(jié)紫外強度和曝光時間

2.最高UV能量設(shè)置可達999.9mj/cm

3.5個254nm的短波紫外燈管

4.LED顯示時間/能量

5.紫外安全門鎖設(shè)計

6.紫外安全視窗

內(nèi)部尺寸 287x 83x287mm

外部尺寸 445x241x381mm

應(yīng)用：

核酸的膜固定、EB染色的DNA缺刻、利用胸腺嘧啶二聚體抑制切割進行基因作圖、檢測recA 功能、紫外滅菌、PCR污染消減等