線粒體異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒

線粒體異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品描述 異檸檬酸脫氫酶（Isocitrate dehydrogenase，IDH）作為三羧酸循環(huán)中的關(guān)鍵酶參與細(xì)胞能量代謝， 能夠催化異檸檬酸氧化脫羧生成 α-酮戊二酸（α-Ketoglutarate，α-KG），并將 NAD 還原為 NADH。線 粒體異檸檬酸脫氫酶（ICDHm）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，對(duì)生物體能 量代謝、生物合成及抗氧化脅迫具有重要作用。 ICDHm 催化異檸檬酸生成 α-酮戊二酸，并將 NAD+還原為 NADH，α-酮戊二酸在 505 nm 處具有 特征吸收峰，通過吸光度的變化即可表征 ICDHm 的活性。

注意事項(xiàng) ①若吸光值超過 1，建議將待測(cè)樣本使用提取液 C 適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改； ②為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書（以實(shí)際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)）， 確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定， 過程中問題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系； ③建議使用蛋白濃度計(jì)算酶活，若使用樣本質(zhì)量計(jì)算則需加測(cè)胞漿提取物酶活，上清（胞漿提取 物）和沉淀（線粒體）酶活之和即為總酶活。 附：使用樣本質(zhì)量計(jì)算的公式 ①胞漿提取物 ICDHm 活性計(jì)算 單位定義：每 g 組織每分鐘生成 1 nmol α-酮戊二酸定義為一個(gè)酶活力單位。 ICDHm（U/g）= x×V 樣×V 提×103 W×V 樣×T = 16.83×x W 注釋：V 樣：反應(yīng)體系中加入待測(cè)樣本的體積，0.04 mL；V 提：加入提取液的體積，1.01 mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，1 h = 60 min；103：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù) 1 μmol =103 nmol。 ②線粒體 ICDHm 活性計(jì)算 單位定義：每 g 組織每分鐘生成 1 nmol α-酮戊二酸定義為一個(gè)酶活力單位。 ICDHm（U/g）= x×V 樣×V 提×103 W×V 樣×T = 6.73×x W 注釋：V 樣：反應(yīng)體系中加入待測(cè)樣本的體積，0.04 mL；V 提：1-④中沉淀重懸時(shí)加入提取液的 體積，0.404 mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，1 h = 60 min；103：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù) 1 μmol =103 nmol。 ③ ICDHm 總活性計(jì)算 ICDHm 總活性=胞漿提取物 ICDHm 活性+線粒體 ICDHm 活性 = 16.83×x W + 6.73×x W