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上海凱朗儀器設(shè)備廠
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厭氧培養(yǎng)箱學(xué)習(xí)指南
2015-5-4 閱讀(336)
一、 厭氧培養(yǎng)箱概述
厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的裝置。它能提供嚴(yán)格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個(gè)系統(tǒng)化、科學(xué)化的工作區(qū)域。在本裝置內(nèi)操作培養(yǎng)，可以培養(yǎng)zui難生長的厭氧生物，又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時(shí)接觸氧而死亡的危險(xiǎn)性。因此本裝置是厭氧生物檢測(cè)科研的理想工具。本裝置也是一物多用的良好儀器，如改變操作方式，為微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。
二、 厭氧培養(yǎng)箱特點(diǎn)
厭氧培養(yǎng)箱是由真空取樣室、恒溫厭氧操作室、氣路、電路控制系統(tǒng)等部分組成。整機(jī)造型新穎、結(jié)構(gòu)緊湊，具有厭氧環(huán)境好、密風(fēng)性能好、溫控精度高，穩(wěn)定性好、使用方便、省氣、經(jīng)濟(jì)、工作安全可靠等優(yōu)點(diǎn)。其特點(diǎn)如下：
1. 使用科學(xué)*手段達(dá)到厭氧環(huán)境的高精度，其恒定性能好、使用可靠；
2. 培養(yǎng)箱溫度采用微電腦控制，能準(zhǔn)確直觀地反映箱內(nèi)溫度，能自動(dòng)進(jìn)行溫度再控制，是一套有效的限溫保護(hù)裝置，確保培養(yǎng)物在安全溫度環(huán)境條件下生長；
3. 箱內(nèi)裝有紫外線殺菌燈，可有效地避免雜菌污染；
4. 氣路裝置，可任意準(zhǔn)確調(diào)節(jié)流量，能任意輸入各種所需氣體；
5. 氣路由微電腦控制，電磁閥啟動(dòng)或閉合、操作靈活；
6. 操作室前窗采用厚透明特種玻璃制作，能清晰直接觀察室內(nèi)操作情況，操作使用塑膠手套可靠舒適、靈活、使用方便；
7. 室內(nèi)裝有除氧催化器。
三、 厭氧培養(yǎng)箱主要技術(shù)指標(biāo)
1. 取樣室形成厭氧狀態(tài)時(shí)間小于5分鐘；
2. 操作室形成厭氧時(shí)間小于1小時(shí)（抽氣充氣置換）；
3. 操作室在停止補(bǔ)充微量混合氣體的情況下，厭氧環(huán)境維持時(shí)間大于10小時(shí)；
4. 使用溫度：室溫+3℃~50℃；
5. 培養(yǎng)室溫度波動(dòng)≤±0.3℃；溫度分布均勻性≤±1.0℃；
6. 操作室內(nèi)體積：820mm×550mm×660mm（長×高×寬），
7. 培養(yǎng)箱尺寸：250mm×190mm×290mm
8. 電源220V±10%AC，功率：500VA
四、厭氧培養(yǎng)箱安裝
1. 整機(jī)應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置，應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備，放置平穩(wěn)；
2. 將混合氣瓶、氮?dú)馄堪卜牌椒€(wěn)，并分別裝好減壓閥（含壓力表），安置在適當(dāng)位置；
3. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合；
五、厭氧培養(yǎng)箱 使用
（一）操作室厭氧環(huán)境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具；
2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度；
3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示紙（封閉）；
4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗(yàn)；
5. 操作室內(nèi)*次置換（氮?dú)庵脫Q）：
A. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y1，使手套鼓起，關(guān)閉閥門1，然后扎緊袋口；
6. 操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣。如此連續(xù)三次氮?dú)庵脫Q。
7. 操作室第四次置換（混合氣體置換）：
（混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%）
A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室先抽真空，并隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣；
B. 關(guān)掉混合氣體閥3，并打開閥5，使混合氣體經(jīng)過流量計(jì)，調(diào)整流量計(jì)，流量為每分鐘10ml左右；
C. 混合氣體重復(fù)2-3次轉(zhuǎn)換，經(jīng)過上述過程，基本形成厭氧環(huán)境。
8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時(shí)后打開美蘭指示紙觀察其變色情況，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境；
9. 開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。
（二）菌種的置入和培養(yǎng)：
1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊；
2. 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門；
3. 取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打開氮?dú)忾y2進(jìn)氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥2。第二次重復(fù)操作一次。第三次操作時(shí)，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打開閥4進(jìn)混合氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束；
4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)；
5. 取樣室外門開啟、關(guān)緊，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）檢驗(yàn)；
6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件：
A. 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示紙觀察，如不正常就必須重新?lián)Q氣；
B. 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通過催化吸收，保證室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右；
C. 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。
D. 操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。
7. 混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。
六、 厭氧培養(yǎng)箱注意事項(xiàng)
1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；
2. 開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法；
3. 培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入；
4. 如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持10小時(shí)厭氧狀態(tài)（超過10小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）；
5. 經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象；
6. 調(diào)換氣瓶時(shí)，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；
真空泵按要求使用，定期檢查加油。
